發(fā)布時間：2020/11/2 7:55:49 閱讀次數(shù)：761
| 香菇源性成分探針法熒光定量 PCR 試劑盒產(chǎn)品及特點 | 本試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有香菇的成分�，F(xiàn)代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性，因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術已經(jīng)無法對食材的真?zhèn)芜M行準確的鑒定。同時部分食材還有致敏性，因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術將對食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本產(chǎn)品就是為滿足這一需求根據(jù)探針法 qPCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品，它具有下列特點： 1. 即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板。 2. 根據(jù)香菇保守區(qū)域設計引物和探針，能專一性地檢測出樣品中的香菇成分，但不能檢測其他非香菇成分。 3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。 4. 一管式閉管操作，降低了交叉污染。 5. 快速，整個檢測過程（按一個樣品計）所需時間僅為 2.0 小時。 6. 對混合樣品中香菇成分的檢測下限為 0.01%，對樣品中香菇成分的核酸檢測下限為 0.1ng/µL。 7. 本只能用于科研，足夠 50 次 20uL 體系的熒光定量 PCR。 | ||||
| 規(guī)格及成分 |
| 成分 | 編號 | 十孔盒包裝 |
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| 2×Probe qPCR MagicMix | 190303 | 1 mL（棕色蓋） | |||
| 熒光PCR 專用模板稀釋液 | 180701 | 1 mL（黃蓋） | |||
| 香菇源性成分探針法 qPCR 引物混合液 | 15-971yw | 100 uL（白蓋） | |||
| 香菇源性成分 qPCR 探針 | 15-971pb | 50 uL（棕色管） | |||
| 香菇源性成分探針法 qPCR 陽性 對照（1×10E8 拷貝/uL） | 60908-502pc | 50 uL（黃蓋） | |||
| 61202 | 20 次（1mL，綠蓋） | ||||
| 使用手冊 | 15-971sc | 1 份 | |||
| 運輸及保存 | 低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時，由于其濃度較 高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。 | ||||
| 自備試劑 | DNA 模板 | ||||
| 香菇源性成分探針法熒光定量 PCR 試劑盒使用方法 | 一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標 準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。 1.標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，最好用帶芯槍頭，下同）。 3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分 | ||||
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| 預變性 | 95℃ | 15 min |
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| PCR 反應 （40 個循環(huán)） | 95℃ | 15sec | |||
| 60℃ | 60sec（采集 FAM 通道的熒光信號） | ||||
| 五、數(shù)據(jù)處理 11. 如果把本試劑盒用于定量檢測，則以陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品的 Ct 值從標準曲線上推算出樣品 DNA 濃度的log 值，再推算出其濃度。 12. 如果把本試劑盒用于定性檢測，只判斷陽性或陰性，則陰性對照 Ct 必須大于或等于 40。陽性對照必須有熒光對數(shù)增長，有典型擴增曲線，Ct 值應該小于或等于30。對待測樣品，如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性，如果小于或等于 35 則為陽性。如果在 35-40 之間，則重復一次。重復實驗的 Ct 值如果大于或等于 40 則 為陰性，如果小于 40，則為陽性。 | |||||
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