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土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

發(fā)布時(shí)間:2022/8/8 12:12:47      閱讀次數(shù):529

 注意:正式測(cè)定前請(qǐng)選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。

貨號(hào): YX-C-B934

規(guī)格: 50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容:

試劑一:粉劑×2 瓶,臨用前每瓶加入 15mL 蒸餾水,用不完的試劑 4℃保存; 試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:乙醚,4℃保存(自備)。

重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)液:液體 10mL×1 瓶,重鉻酸鉀溶液2.55mmol/L,相當(dāng)于 0.1mg/mL 紫色沒(méi)食子素溶液。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:

0.5mol/L HCL 溶液將標(biāo)準(zhǔn)液稀釋至 0.10.05、0.0250.0125、0.006250.003125、0mg/mL。

產(chǎn)品說(shuō)明:

S-PPO 主要來(lái)源于土壤微生物、植物根系分泌物及動(dòng)植物殘?bào)w分解釋放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌與土壤中蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、礦物等物質(zhì)反應(yīng)生成有機(jī)質(zhì)和色素,完成土壤芳香族化合物循環(huán),用于土壤環(huán)境修復(fù)。

S-PPO 能夠催化鄰苯三酚產(chǎn)生紫色沒(méi)食子素,后者在 430nm 有特征光吸收。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 比色皿、乙醚(不允許快遞、冰和蒸餾水。

操作步驟:

1、可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 430nm,試劑三調(diào)零。

2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:取 1mL 稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)液于比色皿中在 430nm 處測(cè)定吸光值 A,根據(jù)吸光度x 和濃度(ymg/mL)做出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3、樣本測(cè)定表

試劑名稱

測(cè)定管

風(fēng)干土樣(g

0.05

試劑一(μL

500

振蕩混勻,30℃恒溫培養(yǎng) 1h

試劑二(μL

200

試劑三(μL

1750

振蕩數(shù)次,室溫靜置 30min,取 1mL 上層液于 430nm 處測(cè)定吸光值 A。


S-PPO 活性計(jì)算:

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將樣品吸光值 Ax)帶入公式中,計(jì)算出樣品濃度 ymg/mL)。單位的定義:每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1mg 紫色沒(méi)食子素定義為一個(gè)酶活力單位。

S-PPO  U/g 土樣  y×V 提取÷W÷T=840×yT  應(yīng)時(shí)間

1h=1/24d;V 提取相:1.75mL;W:樣品質(zhì)量,0.05g。


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