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發(fā)布時間：2022/8/8 12:16:34 閱讀次數：393
土壤脲酶（S-UE）分光法試劑盒
貨號: YX-C-B933
規(guī)格: 50T/24S
試劑一：甲苯 10mL×1 瓶，4℃保存；（自備）
試劑二：粉劑×1 瓶，臨用前加入 20mL 蒸餾水，充分溶解待用，4℃保存； 試劑三：液體 65mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四 A 液：液體 2mL×1 瓶，4℃保存；
土壤脲酶（S-UE）分光法試劑盒
試劑四 B 液：液體 8mL×1 瓶，4℃保存；臨用前將 A液倒入 B 液中混合，待用；未用完的液體
4℃保存一周。
試劑五：液體 10mL×1 瓶，4℃保存；
標準品：液體 1mL×1 支， 1mg/mL 氮標準液
S-UE 能夠水解尿素，產生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數量、有機物質含量、全氮和速效氮含量呈正相關。土壤脲酶活性反應了土壤的氮素狀況。
本法以尿素為基質，利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的 NH3-N，生成的藍色靛酚和氨的濃度成正比。
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。
1、分光光度計預熱 30min 以上，調節(jié)波長至 630nm，蒸餾水調零
2、培養(yǎng)
| 試劑名稱 | 測定管 | 對照管 |
| 風干土樣（g） | 0.25 | 0.25 |
| 試劑一（μL） | 125 | 125 |
| 振蕩混勻，使土樣全部濕潤，室溫放置 15min | ||
| 試劑二（μL） | 625 |
|
| 蒸餾水（μL） |
| 625 |
| 試劑三（μL） | 1250 | 1250 |
混勻，放入 37℃水浴培養(yǎng) 24h 后，10000g 常溫離心 10min，取上清液。
2、將培養(yǎng)結束的上清液稀釋 10 倍（取 0.1mL 上清液，加入 0.9mL 蒸餾水）若吸光值仍大于 1.5 繼續(xù)稀釋。
3、標準品的準備：吸取適量的標準溶液，稀釋至 10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/ml。
4、測氨量
|
| 測定管 | 對照管 | 標準管 |
| 稀釋后的上清液或標準液 | 400 | 400 | 400 |
| 試劑四（μL） | 80 | 80 | 80 |
| 試劑五（μL） | 60 | 60 | 60 |
| 充分混勻，室溫放置 20min | |||
| 蒸餾水（μL） | 460 | 460 | 460 |
混勻，630nm 處蒸餾水調零，測 A 值，ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設一個對照管。
標準曲線的建立：根據標準管的濃度（y）和吸光度（x,減去濃度為 0 的空白管），做標準曲線。
根據標準曲線，將ΔA（x）帶入公式計算測定中樣品的濃度（μg/mL）y 值。單位的定義：每天每 g 土樣中產生 1μg NH3-N 定義為一個酶活力單位。
脲酶活力（U/g 土樣）＝y×10×V 反總÷W÷T=80×y
10：稀釋倍數；T：反應時間，1d；V 反總：反應體系總體積：2mL；W：樣本質量，0.25g。
土壤脲酶（S-UE）分光法試劑盒
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