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胎牛血清出現(xiàn)沉淀物怎么辦？

發(fā)布時(shí)間：2022/9/28 16:05:02      閱讀次數(shù)：667

 胎牛血清出現(xiàn)沉淀物怎么辦？

1，血清中可能出現(xiàn)的沉淀物是什么？

基于HyClone公司的經(jīng)驗(yàn)以及多年的試驗(yàn)研究，用于細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清以及其它血清中可能會(huì)存在以下種類的沉淀物：:( 1）纖維蛋白，它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物，可以達(dá)到1-2mm的，可以用肉眼觀察到。因?yàn)檠宥际窃诘蜏叵逻M(jìn)行收集和快速處理的，一些纖維蛋白原（可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體）在處理過(guò)程中仍然處于溶解狀態(tài)，當(dāng)經(jīng)過(guò)最后的過(guò)濾分裝后，就會(huì)在瓶中凝結(jié)出現(xiàn)纖維蛋白沉淀。（2）磷酸鈣，它也是常見(jiàn)的一種沉淀物，通常會(huì)使血清出現(xiàn)渾濁，并且在37℃培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點(diǎn)，這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去可以活動(dòng)，因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染;（3）膽固醇，脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)。他們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見(jiàn)原因。
 
2，血清中的沉淀物對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有什么影響？
（1）細(xì)胞生長(zhǎng)，我們的試驗(yàn)以及經(jīng)驗(yàn)表明沉淀物不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)，我們的客戶以及其它血清生產(chǎn)商也證明了這一點(diǎn)。（2）過(guò)濾，如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物，血清將很難過(guò)濾。一般說(shuō)來(lái)，因?yàn)樵谘迳a(chǎn)時(shí)最后已經(jīng)經(jīng)過(guò)100納米或者40納米的過(guò)濾處理，并且經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的無(wú)菌檢測(cè)，因此海克隆不推薦再過(guò)濾用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清。在實(shí)驗(yàn)室中沒(méi)有必要再過(guò)濾處理血清，在大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)中往往將血清直接加到培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。（3）污染，磷酸鈣往往被誤認(rèn)為微生物污染而引起爭(zhēng)端。研究者可能會(huì)在血清中觀察到一些絮狀的沉淀，因此就會(huì)比較警覺(jué)的去做無(wú)菌試驗(yàn)，將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天，結(jié)果可能會(huì)觀察到更多的絮狀沉淀，因此就斷定血清被污染了。并且當(dāng)研究者將血清樣品放在倒置顯微鏡下觀察時(shí)往往可以看到一些可以運(yùn)動(dòng)的小黑點(diǎn)，因此 就更加確認(rèn)是血清被污染了。于是，研究者就會(huì)花費(fèi)更多的時(shí)間和精力來(lái)和生產(chǎn)商確認(rèn)，但最終確定血清沒(méi)有被污染而只是沉淀。為了避免這些問(wèn)題的發(fā)生，我們建議不要直接將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察是否有菌，而是將血清加到瓊脂板上進(jìn)行培養(yǎng)以觀察是否有細(xì)菌生長(zhǎng)。另外，也可以進(jìn)行革蘭氏染色，在油鏡下觀察，以確認(rèn)是否有污染。
 
3、如何避免血清中沉淀物的出現(xiàn)？
首先要注意正確的血清解凍步驟，而且溶解過(guò)程中一定要每隔一段時(shí)間均勻而緩慢的搖動(dòng)血清。我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在下列情況下沉淀物可能增加，使用中應(yīng)該盡量避免：（1）熱滅活血清；（2）在37℃下培養(yǎng)血清；（3）反復(fù)凍融；（4）γ射線照射；（5）長(zhǎng)期儲(chǔ)存在2-8℃；（6）在室溫下放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)
 
4、如何去除血清中的沉淀？
如想去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝到無(wú)菌離心管中，以400g離心，上清液即可直接加入到培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。注意：不要以過(guò)濾的方式去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)檫@可能阻塞濾膜。 胎牛血清出現(xiàn)沉淀物怎么辦？


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