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發(fā)布時間：2023/2/20 10:02:28 閱讀次數：947
鈣檢測試劑盒(鄰甲酚酞絡合酮比色法)
產品簡介：
鈣(Calcium)是一種金屬元素，常溫下呈銀白色晶體，動物的骨骼、蛤殼、蛋殼都含有碳酸鈣,檢測生命體鈣含量，主要通過檢測鈣離子濃度實現的,用分光度法檢測鈣較為常見該法需要合適的金屬指示劑或選擇性結合鈣離子后引起變色的染料化合物目前較為常用的染料有鄰-甲酚酞絡合酮(OCPC)、偶氮砷Ⅲ、甲基麝香草酚藍(MTB)等。
雅吉生物鈣檢測試劑盒(鄰甲酚酞絡合酮比色法)是利用溶液中鈣離子在堿性條件下能與OCPC結合，生成紫紅色的絡合物，加入鎂離子螯合劑，去除鎂離子背景干擾，通過分光光度計檢測575nm處吸光度，根據公式計算出總鈣含量。
該法的優(yōu)點：
1、是國際上推薦的血清鈣的常規(guī)檢測方法;
2、試劑單一，操作簡便;
3、靈敏度高;
4、顯色穩(wěn)定;
5、使用樣本量小。
該試劑盒僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。
產品組成：
| 名稱 | 50T | Storage |
| 試劑(A):鈣標準(2.5mmol/L) | 1ml | 4℃避光 |
| 試劑(B):Ca Assay Buffer | 50ml | RT避光 |
| 試劑(C):OCPC顯色液 | 50ml | 4℃避光 |
| 試劑(D):ddH2O | 10ml | RT |
自備材料：
1、離心管或試管
2、比色杯、分光光度計
操作步驟(僅供參考)：
1、制備樣品︰
①血漿、血清樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備，可以直接用于該試劑盒的測定，-20°℃凍存，用于Ca的檢測。
②細胞或組織樣品︰取恰當細胞或組織進行勻漿，低速離心取上清，-20℃凍存，用于Ca的檢測。
③高濃度樣品︰如果樣品中含有較高濃度的Ca，可以使用ddHzO稀釋，不宜使用普通蒸餾水稀釋。
2、配制Ca顯色工作液︰臨用前，取Ca Assay Buffer和OCPC顯色液等量混合，即為Ca顯色工作液，即配即用;4℃避光保存，不宜久置。
3、Ca加樣︰選用經稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥試管或者一次性無菌聚乙烯離心管，
按照下表設置空白管、標準管、測定管，溶液應按照順序依次加入，并注意避免產生氣泡。如果樣品中的鈣離子含量過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定，樣品的檢測最好能設置平行管。
| 加入物（μl） | 空白管 | 標準管 | 測定管 |
| ddH2O | 0.025 | - | - |
| 鈣標準(2.5mmol/L) | - | 0.025 | - |
| 待測樣本 | - | - | 0.025 |
| Ca顯色工作液 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
4、Ca測定:混勻，室溫靜置10min ,以空白管調零，比色杯光徑1cm ,分光光度計575nm處檢測，讀取標準管、測定管的吸光度(即為A標準，A測定)。
計算:
血清、血漿中鈣(mmol/L)=(A測定/A標準)×2.5
組織中鈣(mmol/mg)=(A測定/A標準)×2.5×V/待測樣品質量(mg)
式中:
A測定=測定管的吸光度
A標準=標準管的吸光度
V=組織提取液的總體積(L)
參考區(qū)間∶
健康成年人血清鈣濃度︰2.1~2.6mmol/L
兒童血清鈣濃度:2.25~2.67mmol/L
性能指標：
線性范圍:1.25~5.0mmol/L
回收率:98%~101.5%
批內CV: 1.08%~1.60%
批間CV∶3.05%~4.12%
注意事項∶
1、溶血樣本對檢測有干擾，盡量避免采用溶血樣本。
2、OCPC顯色液偶爾會結晶析出，配制成的顯色工作液有時會析出，可取上清液使用。
3、該試劑盒對鈣離子敏感度較高，測定器皿一定要干凈，最好使用一次性聚乙烯塑料器皿。
4、可用血清或肝素抗凝血漿樣本，不宜采用鈣螯合劑及草酸鹽做抗凝劑的樣本。5、膽紅素可產生負干擾，含有較高膽紅素的樣本可用血清對照消除該干擾。
6、本法能夠用于自動生化分析儀終點檢測法。
7、在該試劑盒條件下建議待測樣品中鈣離子濃度應大于0.5mmolL為宜，否則有可能造成檢測誤差。
8、如果樣品濃度過高，應用蒸餾水稀釋后重測，結果乘以稀釋倍數。
有效期∶6個月有效﹔常溫運輸，4℃保存。
附錄:標準曲線制作:雅吉生物在室溫條件下按說明書操作，對5mM鈣標準進行系列稀釋并通過酶標儀570nm測定相應的吸光度值，其標準曲線參考如下根據檢測結果我們建議0.1~3mM的樣品可以直接檢測，3mM以上的樣品根據初檢結果做適當稀釋再次檢測。
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