人結(jié)腸癌細(xì)胞簡介^[1-3]

人結(jié)腸癌細(xì)胞是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學(xué)研究等，還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有不可替代性作用，市場前景廣闊。

人結(jié)腸癌細(xì)胞

常用的結(jié)直腸癌細(xì)胞系：

1.SW480：來源自51歲白人原位直腸腺癌組織，上皮細(xì)胞，CSAp和直腸抗體3陰性，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，p53基因第273位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，309位密碼子的C→T突變導(dǎo)致Pro→Ser替代。細(xì)胞p53蛋白表達(dá)水平提高，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達(dá)呈陽性，癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測。不表達(dá)細(xì)胞溶解酶，一種與腫瘤入侵相關(guān)的金屬蛋白酶。ras原癌基因的12位密碼子有一個突變，可以用作PCR法檢測該突變的陽性對照。

2.SW620：來源于SW480同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶，上皮細(xì)胞，主要由無絨毛的小圓球細(xì)胞和雙極細(xì)胞組成，僅合成少量癌胚抗原（CEA），且在裸鼠中有高度的致瘤性。

3.SW1116：來源于人三期結(jié)腸腺癌轉(zhuǎn)，上皮細(xì)胞，CSAp陰性，結(jié)腸抗原3陰性，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，癌基因c-myc，K-ras，H-ras，Myb，sis和fos的表達(dá)呈陽性，未檢測到癌基因N-myc和N-ras的表達(dá)，表達(dá)腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白CC-4、CC-5和CC-6。

4.LOVO：LoVo建自1971年，從診斷為結(jié)腸腺癌的56歲男性白人的一個轉(zhuǎn)移到左鎖骨上區(qū)的腫瘤結(jié)節(jié)建系。癌基因c-myc，K-ras，H-ras，N-ras，Myb，sis和fos的表達(dá)呈陽性，未檢測到N-myc的表達(dá)。該細(xì)胞在裸鼠中能成瘤，表達(dá)腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白蛋白CC-3和CC-4。

5.HCT116：來源于人結(jié)直腸癌組織，上皮細(xì)胞，1979年Brattain M等從患結(jié)腸癌的男性病人中分離建立的3株惡性細(xì)胞之一，產(chǎn)生CEA角蛋白。HCT116對無胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮樣的腫瘤。

6.HCT-15：來源于人結(jié)直腸腺癌組織，上皮細(xì)胞，細(xì)胞呈CSAp陰性，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，表達(dá)癌胚抗原。

7.HT-29：1964年由Fogh J用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的。該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤，也能在類固醇處理的地鼠中成瘤，可合成IgA、CEA、TGFβ結(jié)合蛋白和黏液素，表達(dá)尿激酶受體，但沒有檢測到血漿酶原活性，不表達(dá)CD4，但細(xì)胞表面表達(dá)半乳糖神經(jīng)酰胺（HIV的可能替代受體）。該細(xì)胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽性；p53基因過表達(dá)，并且在273位密碼子存在G→A突變。

8.LS 180：來源于人結(jié)腸組織，上皮細(xì)胞，表達(dá)抗體：結(jié)腸癌抗原3，人類表達(dá)HLAA2，B13，B50，表達(dá)基因：癌胚抗原（CEA），白細(xì)胞介素10，白細(xì)胞介素6，粘蛋白。

9.LS 174T：是LS 180結(jié)腸腺癌細(xì)胞株的胰蛋白酶化變種，比親本更易傳代，像LS 180一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。電鏡研究表明，它有豐富的微絲和細(xì)胞質(zhì)黏液素液泡；直腸抗原3陽性；p53抗原表達(dá)陰性，但mRNA表達(dá)陽性；角蛋白陽性；癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表達(dá)呈陽性；癌基因k-ras和sis的表達(dá)未做檢測；可產(chǎn)生IL-10、IL-6和黏蛋白。

10.NCI-H716：1984年建系，源自一位33歲患有大腸腺癌男性經(jīng)5-fu治療后的腹水�？稍诼闶笾谐闪�。細(xì)胞表達(dá)多巴脫羧酶，細(xì)胞質(zhì)中有核心致密的內(nèi)分泌型顆粒。細(xì)胞不表達(dá)TAG-72，CA19-9和CEA。

11.Caco-2：分離自直腸原位癌組織，上皮細(xì)胞。當(dāng)長到滿時，細(xì)胞表現(xiàn)出特征性的腸上皮細(xì)胞分化。Caco-2細(xì)胞表達(dá)維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白II，并呈角質(zhì)蛋白陽性。

12.COLO 205：1957年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水中分離的。該病人在取腹水樣品前已用5-氟尿嘧啶治療4~6周。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性；產(chǎn)生CEA、IL10。

13.COLO 320：來源于結(jié)腸組織，結(jié)腸腺癌細(xì)胞，該細(xì)胞能合成復(fù)合胺，腎上腺素。

14.COLO 320DM：來源于Dukes氏C型結(jié)直腸腺癌組織，結(jié)直腸腺癌細(xì)胞，CEA、CSAp和結(jié)腸抗原3呈陰性，該細(xì)胞可產(chǎn)生5-羥色胺、去甲腎上腺素、腎上腺素、ACTH和甲狀旁腺素。角蛋白、波形蛋白弱陽性。

15.CT26.WT：CT26是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)誘導(dǎo)形成的未分化結(jié)腸癌細(xì)胞株，它克隆形成的細(xì)胞株命名為CT26.WT。用包含編碼典型腫瘤相關(guān)抗原(TAA)beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CT26.WT，得到致死的亞克隆CT26.CL25。即使CT26.CL25表達(dá)了典型的TAA beta-半乳糖苷酶，在正常小鼠中CT26.CL25和CT26.WT的生長率與致死率也保持基本一致。與CT26.CL25一起可用作測試免疫治療程序的模型，并用于研究宿主免疫反應(yīng)。

16.DLD-1：1977-1979年間D.L.Dexter和同事分離的兩株結(jié)直腸腺癌細(xì)胞株中的一株。細(xì)胞的CSAp陰性(CSAp-)。DLD-1細(xì)胞的p53抗原表達(dá)呈陽性(p53抗原產(chǎn)生了一個C→T點突變導(dǎo)致241位的Ser→Phe)。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。癌基因c-myc,K-ras,H-ras,N-ras,myb,sis和fos的表達(dá)呈陽性。癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測。表達(dá)腫瘤特異性核基質(zhì)蛋白CC-2,CC-3,CC-4,CC-5和CC-6。

17.RKO：是一個低分化的結(jié)腸癌細(xì)胞系。RKO細(xì)胞含有野生型P53，但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TR beta 1)。RKO細(xì)胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6細(xì)胞。RKO細(xì)胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的親本細(xì)胞系。該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤，且在軟瓊脂中形成集落。

18.RKO-E6：是用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pCMV-E6的結(jié)腸癌RKO細(xì)胞系。該細(xì)胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細(xì)胞病毒啟動子的人乳頭狀病毒（HPV）E6癌基因。RKO-E6細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細(xì)胞參數(shù)改變p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄和凋亡等。

19.RKO-AS45-1：人的cDNA中編碼GADD45的開放閱讀框克隆到表達(dá)載體pCMV.3中，轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞RKO，建立了RKO-AS45-1細(xì)胞株。該細(xì)胞含有穩(wěn)定整合巨細(xì)胞病毒（CMV）啟動子的表達(dá)載體。RKO-AS45-1細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于Gadd45對DNA修復(fù)、凋亡和藥物敏感性研究。

20.T84：來源于一位72歲的男性結(jié)直腸癌患者的肺部轉(zhuǎn)移灶；皮下接種至BALB/c裸鼠并連續(xù)傳代23次后建立該細(xì)胞系。在裸鼠身上傳代的過程中，該腫瘤仍保持原始的結(jié)直腸癌的組織學(xué)特性。T84細(xì)胞系生長至飽和狀態(tài)時形成單層細(xì)胞，相鄰細(xì)胞間有緊密連接和細(xì)胞橋粒；該細(xì)胞有多種肽類激素、神經(jīng)遞質(zhì)和維持電解質(zhì)的定向運輸?shù)氖荏w，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。

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