一. 試劑盒說明
熒光素酶（Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱，其中最有代表性的是來自北美螢火蟲（Photinus pyralis）體內(nèi)的熒光素酶。螢火蟲熒光素酶屬于加氧酶（oxygenase），其發(fā)光反應(yīng)需要O2和Mg2+參與；有輔酶A（CoA）存在時能提高反應(yīng)效率，增加發(fā)光時間。螢火蟲熒光素酶無需翻譯后修飾，即可表現(xiàn)出熒光素酶活性。本產(chǎn)品將螢火蟲熒光素酶的基因插入慢病毒介導(dǎo)的載體中，通過CAG啟動子過表達從而作為報告基因，在細胞中表達。常用于細胞標記后小動物細胞移植活體成像追蹤，從而評估移植后細胞的歸巢以及治療效果等。
二.試劑盒組份
| 組份 | Cat： | 儲存條件 |
| 螢光素酶標記液 | 1 ml | 4 ℃ |
| polybrene | 8 μg/ml | 4℃ |
三. 注意事項
螢光素酶標記液避免反復(fù)凍融，操作時要戴手套和口罩。該產(chǎn)品僅限于非臨床性科研使用。
四. 操作步驟
細胞傳代培養(yǎng)到6孔板或者6cm盤中12-16小時后，將螢光素酶標記液0.3ml（6孔板）或者0.5ml（6cm盤）分別與新鮮細胞培養(yǎng)液混勻，比例為0.3ml螢光素酶標記液中加入0.7ml新鮮培養(yǎng)液和1.0μl polybrene（終濃度8ng/ml），0.5ml螢光素酶標記液中加入1.5ml新鮮培養(yǎng)液和2μl polybrean（終濃度8ng/ml）。預(yù)混好的螢光素酶標記液加入到目的細胞培養(yǎng)皿中，此時細胞密度不宜超過60%。2個小時之內(nèi)每間隔15-30min輕輕晃動被標記的細胞培養(yǎng)皿，可以達到更好的標記效果，2小時之后培養(yǎng)皿中補充等體積的新鮮培養(yǎng)液，過夜培養(yǎng)后更換成新鮮培養(yǎng)液。48h之后，利用Progema公司生產(chǎn)的螢光素酶檢測試劑盒檢測標記效果。
