呋喃西林檢測卡
使用說明書
(膠體金法)
1 原理及用途
本產(chǎn)品應用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測蜂蜜、組織、肝臟等樣本中的呋喃西林代謝物(SEM)。
樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后,樣本溶液中的呋喃西林代謝物與金標抗體相結(jié)合,從而阻止金標抗體與纖維素膜上呋喃西林偶聯(lián)物結(jié)合。當樣本溶液中的呋喃西林代謝物含量大于檢測限時檢測線不顯色(或顯色比對照線淺),結(jié)果為陽性;當樣本溶液中呋喃西林代謝物含量小于檢測限時檢測線顯紫紅色(顯色與對照線一致或更深),結(jié)果為陰性。
2 技術(shù)指標
2.1 試劑卡靈敏度:1ppb(ng/ml)
對樣本的最終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。
2.2 樣本檢測下限:
蜂蜜、組織、腸衣、肝臟………………………0.5ppb
3 試劑盒組成
檢測卡……………………50個/盒
樣本復溶液……………………1瓶
衍生化試劑……………………3瓶
說明書…………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl
4.3試劑:乙酸乙酯、正己烷、氫氧化鈉、濃HCl、K2HPO4·3H2O
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結(jié)果。
5.2 配液:
配液1:0.5M K2HPO4 溶液
稱11.4g K2HPO4▪3H2O加去離子水溶解定溶至100ml。
配液2:1M HCL
8.6mL濃HCL加去離子水定容至100mL。
配液3:1M NaOH溶液
稱取4g NaOH,加去離子水定容至100ml
5.3蜂蜜、組織、腸衣、肝臟樣本處理方法
1)稱取2±0.05g均質(zhì)樣本于離心管中,加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和600μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;
2)65℃水浴孵育30分鐘;
3)分別加入1ml 0.5M K2HPO4溶液,0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯,振蕩5分鐘;
4)室溫下4000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘;
5)取出2.5ml的上層液到另一個離心管中,50-60℃氮氣或空氣吹干;
6)用1ml正已烷溶解殘留物,加入0.5ml復溶液充分振蕩混合30秒;室溫4000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘;
7)上層為正已烷,取下層樣本液用于分析。
濃縮倍數(shù)為:2 檢測下限:0.5ppb
6 實驗步驟
6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上。
6.2 用配套吸管吸取已準備好的樣本液體,緩慢、逐滴的(應避免泡沫產(chǎn)生)滴加2-3滴(約60ul)到加樣孔(S)內(nèi)。
6.3 室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果。超過10分鐘的結(jié)果只能作為參考。
7 結(jié)果判斷
陰性(-):C線顯紅色,T線比C線顯色深或者一樣深,表示樣本中呋喃西林濃度低于檢測下限,或不含有。
陽性(+):C線顯紅色,T線比C線顯色淺或者不顯色,則表示樣本中呋喃西林濃度高于檢測下限。
無效:未出現(xiàn)質(zhì)控C線,表明操作過程不正確或檢測卡已失效。
8 注意事項
8.1 過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
8.2 檢測卡從冰箱中取出時應恢復到室溫后打開,打開的檢測卡應盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5 待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細菌污染,否則容易導致阻塞、顯色不明顯等異常現(xiàn)象,從而影響實驗結(jié)果的判定。
9 貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。