UC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp)所克隆的ORF1ab(168bp)含有中國(guó)疾控中心所公布的SARS-CoV-2冠狀病毒基因組中開(kāi)放讀碼框ORF1ab(open reading frame 1ab，ORF1ab)熒光檢測(cè)RT-PCR特異性引物(1ab-F: 5'-CCCTGTGGGTTTTACACTTAA-3'；1ab-R: 5'-ACGATTGTGCATCAGCTGA-3'，該對(duì)引物擴(kuò)增產(chǎn)生119bp片段)擴(kuò)增所包含區(qū)域，該克隆適用于SARS-CoV-2 的特異性檢測(cè)。
SARS-CoV-2 ORF1大約占整個(gè)基因組長(zhǎng)度的三分之二，位于病毒基因組5'端，編碼病毒復(fù)制酶，包括ORF1a和ORF1b。ORF1a和ORF1b分別編碼兩個(gè)多聚蛋白(poly-protein)即pp1a和pp1ab，多聚蛋白產(chǎn)生后，被病毒編碼的類(lèi)胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin-like protease，3CLpro )或1-2個(gè)類(lèi)木瓜蛋白酶(papain-like protease，PLP)水解為具有獨(dú)立生物學(xué)功能的十六個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白(NSP1-NSP16)，其中ORF1a 編碼 NSP1-NSP11，而ORF1b編碼NSP12-16。
pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp)質(zhì)粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| M13/pUC Forward Primer | 378-395 |
| ORF1ab | 405-572 |
| Multiple cloning site | 573-594 |
| M13/pUC Reverse Primer | 608-625 |
| Lac operator | 633-649 |
| Lac Promoter | 657-687 |
| ColE1 origin of replication(Ori) | 1011-1599 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 1770-2630 |
pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp)質(zhì)粒(2830bp)的圖譜如下：
pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp)的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜見(jiàn)
pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp)中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab (168bp))包括：
AflII
| AccI | AfeI | AgeI | AleI | ApaI | AscI | |
| AsiSI | AvrII | BaeI | BbsI | BbvCI | BfuAI | BglII |
| BlpI | BmgBI | BmtI | Bpu10I | BsaAI | BsaBI | BseRI |
| BsgI | BsiWI | BsmFI | BsmI | BspDI | BspEI | BspMI |
| BsrGI | BssHII | BstBI | BstEII | BstXI | BstZ17I | Bsu36I |
| BtgI | BtgZI | ClaI | CspCI | DraIII | EagI | EcoNI |
| EcoRV | FseI | HincII | HpaI | MfeI | MluI | MscI |
| NaeI | NcoI | NgoMIV | NheI | NotI | NruI | NsiI |
| PacI | PaeR7I | PflFI | PflMI | PmeI | PmlI | PpuMI |
| PshAI | PsiI | PspOMI | PspXI | PstI | RsrII | SacII |
| SalI | SbfI | SexAI | SfiI | SgrAI | SnaBI | SpeI |
| SphI | SrfI | StuI | StyI | SwaI | Tth111I | XbaI |
| XcmI | XhoI |
pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp)中的單酶切位點(diǎn)（Restriction enzymes that cut pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp)）包括：
| AatII | G,ACGT`C | 2761 | EcoO109I | RG`GNC,CY | 2819 |
| Acc65I | G`GTAC,C | 282 | EcoRI | G`AATT,C | 594 |
| AflIII | A`CRYG,T | 950 | HindIII | A`AGCT,T | 399 |
| AhdI | GACNN,NN`NGTC | 1842 | KasI | G`GCGC,C | 235 |
| AlwNI | CAG,NNN`CTG | 1363 | KpnI | G,GTAC`C | 586 |
| ApoI | R`AATT,Y | 594 | NarI | GG`CG,CC | 236 |
| AvaI | C`YCGR,G | 578 | NdeI | CA`TA,TG | 184 |
| BamHI | G`GATC,C | 573 | NmeAIII | GCCGAG(N)19,NN` | 1900 |
| BanII | G,RGCYC | 588 | PciI | A`CATG,T | 950 |
| BcgI | ,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` | 2346 | PluTI | G,GCGC`C | 235 |
| BclI | T`GATC,A | 501 | SacI | G,AGCT`C | 592 |
| BpmI | CTGGAG(N)14,NN` | 1911 | SapI | GCTCTTCN`NNN, | 834 |
| BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 1904 | ScaI | AGT|ACT | 2323 |
| BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 792 | SfoI | GGC|GCC | 237 |
| BseYI | C`CCAG,C | 1254 | SmaI | CCC|GGG | 580 |
| BsoBI | C`YCGR,G | 578 | SspI | AAT|ATT | 2647 |
| BspQI | GCTCTTCN`NNN, | 834 | TspMI | C`CCGG,G | 578 |
| BsrFI | R`CCGG,Y | 1923 | XmaI | C`CCGG,G | 578 |
| BstAPI | GCAN,NNN`NTGC | 182 | XmnI | GAANN|NNTTC | 2442 |
| Eco53kI | GAG|CTC | 590 | ZraI | GAC|GTC | 2763 |
pUC18-SARS-CoV2-ORF1ab(168bp)質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
M13 fwd(378-395): 5'- TGTAAAACGACGG CCAGT -3'
M13 rev (608-625): 5'- CAGGAAACAGCTATGACC -3'
pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp)的全序列信息:D2953 pUC18-SARS-CoV2-ORF1ab(168bp)序列.txt。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝 |
| D2953-1μg | pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp) | 1μg |
| D2953-100μg | pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp) | 100μg |
| — | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件：
-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
本質(zhì)粒未經(jīng)書(shū)面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
