Golgi-Tracker Red是一種高爾基體紅色熒光探針，是神經(jīng)鞘脂(sphingolipid)類(lèi)熒光探針中的一種，可以用于活細(xì)胞高爾基體特異性熒光染色。
Golgi-Tracker Red為采用Molecular Probes公司的BODIPY TR進(jìn)行了熒光標(biāo)記的C5-ceramide。Ceramide或其類(lèi)似物可以選擇性地和高爾基體結(jié)合，因此熒光標(biāo)記的ceramide可以用作高爾基體特異性的熒光探針。Golgi-Tracker Red可以用于活細(xì)胞的高爾基體熒光標(biāo)記，但不適合用于固定細(xì)胞的標(biāo)記。Golgi-Tracker Red的化學(xué)結(jié)構(gòu)式參考圖1。
圖1.Golgi-Tracker Red的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。Golgi-Tracker Red分子式為C39H50BF2N3O4S，分子量為705.71，呈紅色熒光，最大激發(fā)波長(zhǎng)為589nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為617nm。Golgi-Tracker Red的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考圖2。
圖2. Golgi-Tracker Red的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。Golgi-Tracker Red常用于活細(xì)胞的脂類(lèi)運(yùn)輸和代謝研究，相比較于傳統(tǒng)的同類(lèi)型探針NBD C6-ceramide，其呈現(xiàn)出更高的摩爾吸光系數(shù)和光量子產(chǎn)量，且光穩(wěn)定性更強(qiáng)。除了以上應(yīng)用，本探針還可用來(lái)測(cè)定Schwann細(xì)胞內(nèi)脂類(lèi)合成的速率，以及標(biāo)記細(xì)胞輪廓以便于共聚焦顯微鏡下觀(guān)察形態(tài)運(yùn)動(dòng)。
本Golgi-Tracker Red探針已與BSA形成復(fù)合物。本產(chǎn)品所屬的神經(jīng)鞘脂類(lèi)熒光探針與BSA形成復(fù)合物后，對(duì)活細(xì)胞高爾基體的標(biāo)記會(huì)更加高效。
本試劑盒提供了Golgi-Tracker Red稀釋液，使Golgi-Tracker Red的使用更加便捷。
按照1:100的比例稀釋?zhuān)梢耘渲?ml Golgi-Tracker Red工作液；按照1:200的比例稀釋?zhuān)梢耘渲?ml Golgi-Tracker Red工作液。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝 |
| C1043-1 | Golgi-Tracker Red (33.3mg/ml, 30µl) | 1mg |
| C1043-2 | Golgi-Tracker Red稀釋液 | 6ml |
| － | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件：
-20℃保存，半年有效。Golgi-Tracker Red需-20℃避光保存。
注意事項(xiàng)：
對(duì)于微量的液體，每次使用前先離心數(shù)秒鐘，使液體充分沉降到管底。
熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
需自備蓋玻片和載玻片
Golgi-Tracker Red可以用于活細(xì)胞的高爾基體熒光標(biāo)記，但不適合用于固定細(xì)胞高爾基體的熒光標(biāo)記。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明：
1.Golgi-Tracker Red工作液的配制：
a.取少量Golgi-Tracker Red按照1:100的比例加入到Golgi-Tracker Red稀釋液中。例如取10µl Golgi-Tracker Red加入到1ml Golgi-Tracker Red稀釋液中�；靹蚝蠹礊镚olgi-Tracker Red工作液。
注：工作液中Golgi-Tracker Red的濃度可以根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，推薦的稀釋比例調(diào)整范圍為1:50-1:200。
b.Golgi-Tracker Red工作液可以在首次使用后回收保存于4℃或-20℃，并重復(fù)使用。1-2天內(nèi)可以4℃保存，更長(zhǎng)時(shí)間則需-20℃保存。使用至達(dá)不到預(yù)期效果時(shí)可以廢棄。
2.活細(xì)胞高爾基體的熒光標(biāo)記：
a.去除細(xì)胞培養(yǎng)液，用適量的溶液如HBSS with Ca2+ & Mg2+ (Hanks' Balanced Salt Solution with Ca2+ & Mg2+)洗滌生長(zhǎng)在蓋玻片上的細(xì)胞。注：HBSS with Ca2+ & Mg2+ (C0219)；對(duì)于懸浮細(xì)胞的染色可以參考貼壁細(xì)胞的染色方法進(jìn)行。
b.去除洗滌液，加入步驟1配制好的Golgi-Tracker Red染色工作液，與細(xì)胞4℃共孵育30分鐘。
c.回收Golgi-Tracker Red染色工作液，用冰浴預(yù)冷的細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞3次左右，換新鮮培養(yǎng)液37℃孵育30分鐘。
d.用新鮮培養(yǎng)液再洗滌一次，隨后通常用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行觀(guān)察。此時(shí)可觀(guān)察到高爾基體呈明亮的強(qiáng)熒光染色，而細(xì)胞內(nèi)的其他膜系統(tǒng)呈比較微弱的熒光染色。
