本產(chǎn)品在柱式植物DNAOUT(CAT#:60602)基礎(chǔ)上改良而得的大提升級(jí)產(chǎn)品,主要用于大量快速?gòu)母鞣N植物組織中提取基因組DNA。與柱式植物DNAOUT相比,它具有下列特點(diǎn):
1. 處理量大,一次可以處理1-3 g植物組織。
2. 純度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制劑,得到的DNA可以 不經(jīng)稀釋直接用于酶切、PCR、 real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting、microsatellite analysis等各種后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
3. 產(chǎn)率一般在100-300 μg/g樣品。離心吸附柱最大吸附量為800 μg。
4. DNA片段長(zhǎng)度一般在20-40 Kb左右。
5. 適用范圍廣,可以使用于絕大多數(shù)植物的各種組織。
6. 不會(huì)發(fā)生離心柱堵塞現(xiàn)象,不需要使用酚和氯仿等有毒試劑。
將2-4 g剪碎的植物組織直接加到10 mL溶液A中,在50 mL離心管中勻漿,加入5 mL溶液B和4 mL氯仿,振蕩30 s,轉(zhuǎn)移上清到一新的50 mL離心管中,加入等體積溶液C,混勻后分兩次轉(zhuǎn)移到大提離心吸附柱中,室溫放置2-5分鐘后離心1 分鐘,加 1 mL膜結(jié)合RNA清除液到離心吸附柱中,室溫放置5-10分鐘,用10 mL 通用洗柱液洗兩次,空甩1分鐘,用1 mL DNA洗脫液2.0洗脫即可。
用本產(chǎn)品提取菠菜基因組DNA的電泳圖。每個(gè)樣的樣品使用量為2 g。洗脫體積均為1mL。上樣體積為15 μL,最后在0.8%瓊脂糖凝膠中電泳后紫外觀察。使用的染料為綠如藍(lán)染料,電泳緩沖液為超快電泳液(實(shí)驗(yàn)編號(hào)305064)。