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柱式細(xì)菌DNAOUT

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 本產(chǎn)品是在在天凈沙細(xì)菌DNAOUT基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)的柱式升級(jí)產(chǎn)品,可以用于絕大多數(shù)革氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌基因組DNA的快速提取。

1. 操作簡(jiǎn)單,整個(gè)過(guò)程需要20分鐘左右(對(duì)一個(gè)樣品而言)。

2. 產(chǎn)率一般在5-30 μg/mL過(guò)液培養(yǎng)細(xì)菌。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段長(zhǎng)度一般在20-40 Kb左右。

3. 適用范圍廣,可以使用于絕大多數(shù)細(xì)菌。也可以使用過(guò)夜培養(yǎng)細(xì)菌和菌落。

4. 得到的DNA可以直接用于PCR,酶切或其他分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

A型適用于G-細(xì)菌,B型適用于G+細(xì)菌。

 

 

1.0 mL過(guò)夜培養(yǎng)的細(xì)菌離心沉淀,棄上清,加入0.3 mL溶液A,吹打均勻,加150 μL 溶液B,顛倒混勻,加入0.2 mL自備氯仿,振蕩混勻半分鐘,室溫13000 rpm離心2分鐘,轉(zhuǎn)移上清到新的離心管中,加入 1.5 倍體積(約0.7 mL)的溶液C+溶液D 的新鮮混合液,顛倒混勻后全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,室溫放置至少2 分鐘后轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,室溫放置2分鐘,離心1分鐘,用通用洗柱液洗1-2次后,加50-100 μL DNA洗脫液,室溫離心1分鐘即得DNA溶液。

 

用本產(chǎn)品提取1.0 mL 過(guò)夜培養(yǎng)的E.coli Tg1細(xì)菌,DNA最后溶于用0.1 mL DNA脫液洗脫,取20 μL上樣。M表示全長(zhǎng)的l DNA,其余均為提取的樣品DNA

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