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柱式酵母質(zhì)粒DNAOUT

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本產(chǎn)品是專(zhuān)門(mén)用于提取酵母質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品(不適用于酵母dsRNA質(zhì)粒)。本

產(chǎn)品根據(jù)酵母細(xì)胞壁十分堅(jiān)硬的特點(diǎn),在細(xì)菌質(zhì)粒堿裂解法的基礎(chǔ)上,增加了高效

裂解酵母細(xì)胞壁的預(yù)處理步驟,可在1小時(shí)左右得到高純的酵母質(zhì)粒DNA,可以用

于PCR或轉(zhuǎn)化。

1. 快速,整個(gè)過(guò)程只需要一個(gè)小時(shí)左右,可同時(shí)處理多個(gè)樣品。

2. 得到的酵母質(zhì)粒DNA純度高,可直接用于轉(zhuǎn)化和PCR等實(shí)驗(yàn)。

3. 可以從平板上的菌斑或液體培養(yǎng)的酵母中抽提質(zhì)粒DNA。

4. 安全,不需使用玻璃珠、酚、氯仿等試劑。

5. 每5 mL酵母培養(yǎng)液一般可以提取到1 μg左右的高拷貝酵母質(zhì)粒DNA。

6. 即開(kāi)即用,經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,客戶(hù)自己不需要準(zhǔn)備額外的試劑。

將5-10 mL過(guò)液培養(yǎng)的酵母培養(yǎng)液(或細(xì)胞數(shù)目相當(dāng)?shù)木洌╇x心,在細(xì)胞沉淀

中加0.3 mL溶液A并混合均勻,95℃10分鐘,離心收集沉淀,加入0.25 mL溶液B并

混合均勻,37 30-60分鐘,再加入0.25 mL溶液C并輕柔顛倒混勻,室溫放置10分

鐘,再加入0.35 mL溶液D并輕柔顛倒混勻,冰浴放置30分鐘,離心,上清液上柱后

室溫放置10分鐘,離心,棄穿透液,再用0.5 mL通用洗柱液洗兩次,最后用DNA洗

脫液將DNA洗脫。

Q:為何酵母質(zhì)粒DNA產(chǎn)率很低?

A:除YEp類(lèi)質(zhì)粒以外的酵母質(zhì)粒的拷貝數(shù)都很低,所以從5-10 mL酵母培養(yǎng)液中

得到的質(zhì)粒DNA一般都不足1 μg。但大部分酵母質(zhì)粒都是穿梭質(zhì)粒,所以大規(guī)

模制備可以在E.coli中進(jìn)行。​​

 

 

 

 

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