乙酰膽堿酯酶即真性膽堿脂酶主要來(lái)自胎兒的興奮性細(xì)胞,反應(yīng)神經(jīng)系統(tǒng)成熟度。胎兒神經(jīng)管閉合缺損(如開(kāi)放性脊柱裂)及開(kāi)放性腹壁缺陷時(shí),羊水中假性膽堿酯酶增加(PchE)。兩者可通過(guò)同時(shí)測(cè)定羊水中PCHE活性并算出羊水ACHE/PchE比值來(lái)區(qū)分,具有很高的科研意義。
乙酰膽堿酯酶(Acetylcholinesterase)水解乙酰膽堿生成膽堿及乙酸,膽堿可以與巰基顯色劑反應(yīng)生成TNB(對(duì)稱(chēng)三硝基苯,Sym-Trinitrobenzene)黃色化合物,根據(jù)顏色深淺進(jìn)行比色定量,水解產(chǎn)物膽堿的數(shù)量可反應(yīng)膽堿酯酶的活力。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約30分鐘,可測(cè)60例左右樣本。
2、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
3、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.5%。
4、回收試驗(yàn): X =97%。
5、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
6、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織,效果均佳。
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為412nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、漩渦混勻器
4、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。
操作流程:
1、按步驟加入樣本和R2、R3
2、漩渦混勻,37℃孵育6分鐘
3、加入R4、R5、R6,室溫靜置15分鐘
4、412nm波長(zhǎng),0.5cm光徑,比色