小腸二糖酶是碳水化合物消化道吸收的關(guān)鍵酶,麥芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶是3種重要的二糖酶,分別水解麥芽糖、蔗糖和乳糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收
機(jī)體由于缺乏乳糖酶等雙糖酶,可導(dǎo)致食物中糖類消化吸收障礙而使未消化吸收的糖類進(jìn)入大腸,被大腸中細(xì)菌分解產(chǎn)生CO2、H2等,引起腹瀉等癥狀
乳糖酶作用于底物產(chǎn)生單糖,該單糖在其氧化酶的作用下產(chǎn)生氧化物質(zhì),氧化物質(zhì)同顯色劑結(jié)合產(chǎn)生紅色的產(chǎn)物,用分光光度計(jì)測(cè)定其光密度值,從而測(cè)定出乳糖酶的活性。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約40分鐘,可測(cè)50例左右樣本。
2、取樣量微:本法取樣量?jī)H為10l
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗(yàn): X =96%。
6、受外界影響因素。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
7、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物組織、腸黏膜等,效果均佳。
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為505nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。
操作流程:
1、按步驟取樣10ul加入底物液
2、漩渦混勻,37℃孵育20分鐘
3、加入終止劑和顯色劑顯色,37℃水浴15分鐘
4、505nm波長(zhǎng),0.5cm光徑,比色