使用說明：
1.取適量Fluo-4 AM母液，用PBS稀釋至0.5-5μM的工作液。
注：工作液須即用即配，請勿反復(fù)凍融。
2.對于待檢測的培養(yǎng)細(xì)胞，去除培養(yǎng)液，用PBS或HBSS洗三遍。
注：因為培養(yǎng)液中的血清含有酯酶會導(dǎo)致Fluo-4 AM分解為Fluo-4，而酚紅會導(dǎo)致熒光背景增強。
3.加入Fluo-4 AM工作液，溶液量以能充分覆蓋細(xì)胞為準(zhǔn)。
4.20℃-37℃孵育10-60分鐘進行熒光探針裝載。
注：如果是首次實驗不能確定孵育溫度和時間，建議先嘗試37℃孵育30分鐘，觀察熒光效果。如果細(xì)胞死亡較多，則適當(dāng)縮短時間或降低溫度；如果熒光強度太弱，則適當(dāng)延長時間。
5.隨后用PBS或HBSS洗滌3次，洗滌后可以考慮適當(dāng)再孵育20-30分鐘以確保Fluo-4 AM在細(xì)胞內(nèi)完全轉(zhuǎn)變成Fluo-4。
6.如有需要，可以使用適當(dāng)藥物來刺激細(xì)胞。
7.用激光共聚焦顯微鏡、熒光酶標(biāo)儀、熒光分光光度計或流式細(xì)胞儀等熒光檢測儀器檢測Fluo-4的熒光，以確定細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| 1060 | Fluo-4 AM(鈣離子熒光探針，2mM) | 25μl |
| 1060 | 說明書 | 1份 |
保存條件：
-20℃避光保存，6個月有效。
注意事項：
Fluo-4 AM遇水極易分解，建議第一次使用時，母液分裝并密封保存，同時注意保持干燥。
Fluo-4 AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
探針的工作濃度、細(xì)胞量、孵育溫度和時間等需要根據(jù)不同實驗預(yù)先摸索。
熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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