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JM109感受態(tài)細胞

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  • 介紹: 基 因 型endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F′traD36 proAB laqIqZΔM15]
  • 簡 要 說 明
  • JM109菌株來源于E.coli K strain,是提取高質(zhì)量DNA的理想菌株,recA1 和 endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提取。攜帶 hsdR17基因型背景,使得異源DNA不被內(nèi)源核酸酶系統(tǒng)降解。laqI qZΔM15的存在使JM109可用于構建克隆,藍白斑篩選實驗;High5TM系列JM109感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉化效率可達1×109cfu/μg。
  • 操 作 說 明
  • 1.JM109感受態(tài)細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì);蜻B接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
  • 2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
  • 3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。
  • 4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
  • 5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
  • 注 意 事 項
  • 1.感受態(tài)細胞最好在冰上融化。冰上放置大約5分鐘即可融化,融化后8分鐘內(nèi)加入質(zhì)粒,否則會影響轉化效率。
  • 2.混入質(zhì);蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
  • 3.轉化高濃度的質(zhì);蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。
  • 儲存條件: -80℃
  • 用途: 克隆感受態(tài)細胞
  • 注意:部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息,我司不保證所提供信息的權威性,僅供客戶參考交流研究之用。
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