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蠟樣芽孢桿菌顯色培養(yǎng)基

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 蠟樣芽孢桿菌顯色培養(yǎng)基是改良的培養(yǎng)基,用于食品、水、乳制品和肉制品中蠟樣芽孢桿菌的快速檢測。改進(jìn)型顯色劑和添加劑,特異性和靈敏度明顯提高。蠟樣芽孢桿菌顯藍(lán)綠色且菌落周圍有一不透明環(huán),其它菌顯藍(lán)綠色、黃色或無色,革蘭氏陰性菌被抑制。 

成分(g/L)

 

 

特殊營養(yǎng)物質(zhì)

20.0

顯色劑

0.5

抑菌劑

4.0

瓊脂

15.0

pH 7.0±0.2 25℃

 

蠟樣芽孢桿菌添加劑 3.0g(已配套,無需另購)

此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果。

用法

稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基 7.95g,加入 180ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取 0.6g 蠟樣芽孢桿菌添加劑,加入 20ml 無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動(dòng) 5-10min,使其乳化均勻,將二者分別于121℃高壓滅菌 15min。冷至 45-50℃左右時(shí),把蠟樣芽孢桿菌添加劑加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中, 輕輕混勻,傾入無菌平皿。使培養(yǎng)基的厚度約為 1-2mm,這樣有利觀察不透明環(huán)。

操作步驟

1、按 GB 標(biāo)準(zhǔn)、SN 標(biāo)準(zhǔn)、FDA 標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;

2、樣品液在 30±1℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時(shí);

3、取增菌液劃線接種于蠟樣芽孢桿菌顯色培養(yǎng)基平板上,36±1℃ 培養(yǎng) 18~24h。蠟樣芽孢桿菌典型菌落為藍(lán)綠色且菌落周圍有一不透明環(huán)。若 24 小時(shí)沒有出現(xiàn)典型菌落,可延長培養(yǎng)至 48 小時(shí);

4、對(duì)可疑蠟樣芽孢桿菌可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上,30±1℃ 培養(yǎng) 18-24 小時(shí),挑取單菌落做蠟樣芽孢桿菌全套生化試驗(yàn)。

質(zhì)量控制

1、外觀

此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動(dòng)性,呈乳白色。制備好的平板呈不透明無色固體培養(yǎng)基。

2、微生物試驗(yàn)

在 36±1℃ 培養(yǎng) 18~24h 小時(shí):

 

 

質(zhì)控菌株

菌株號(hào)

生長情況

菌落顏色

蠟樣芽孢桿菌

CMCC63303

+++

深藍(lán)色且菌落周圍有一圈不透明環(huán)

蠟樣芽孢桿菌

ATCC11778

+++

藍(lán)綠色,菌落比較大,扁平,且菌落周圍有一圈不透明環(huán)

枯草芽孢桿菌

CMCC63501

++

白色,菌落周圍沒有不透明環(huán)

金黃色葡萄球菌

ATCC25923

-/+

白色

大腸桿菌

ATCC25922

-

白色

 

方法的局限性

本培養(yǎng)基鑒定蠟樣芽孢桿菌,有時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)假陽性,需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。蘇云金芽孢桿菌在本培養(yǎng)基上顯色與蠟樣芽孢桿菌相同,但食品中一般很少。

 

典型特征

蠟樣芽孢桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,菌落周圍有一不透明環(huán)

貯存

制備好的平板應(yīng)立即使用,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。

失效

干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。

注意

此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。

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