本產(chǎn)品采用獨(dú)特的真菌裂解技術(shù)，能夠裂解包括孢子在內(nèi)的各種真菌堅(jiān)硬的外殼，同時(shí)結(jié)合硅膠膜離心吸附柱技術(shù)純化真菌DNA，通過(guò)氯仿抽提，有效去除蛋白等雜質(zhì)污染，提取的DNA純度高，OD 260/280≈1.9，大小在30-50 kb之間，可直接用于各種PCR、酶切、Southern blot 等常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。本產(chǎn)品安全無(wú)毒，操作簡(jiǎn)單，整個(gè)操作過(guò)程大約需要40 min。
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品信息：
| 組分 | 總量 | 備注 |
| 真菌裂解液 1（FLB1） | 50ml | 如有沉淀，65℃加熱溶解后使用 |
| 真菌裂解液 2（FLB2） | 50ml | 4℃保存 |
| 膜結(jié)合液（MB） | 50ml | |
| 通用漂洗液（WB） | 50ml | |
| 通用洗脫液（EB） | 10ml | |
| 離心吸附柱及收集管 | 50套 | 密閉干燥保存 |
使用方法
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備： 自備的材料：液氮，氯仿，1.5 ml 滅菌離心管，研缽，渦旋振蕩器，臺(tái)式離心機(jī)，65℃水浴，冰浴。 操作步驟： 1、稱(chēng)取0.1-0.5 g濕的真菌菌絲、孢子、子實(shí)體或0.1-3 ml液體培養(yǎng)物離心得到的沉淀，轉(zhuǎn)移到塑料研缽中，液氮研磨成粉 后轉(zhuǎn)移到新的1.5 ml離心管中。 注：1）盡量避免使用陶瓷或玻璃研缽，以免二氧化硅吸附 DNA影響得率。2）干燥菌絲或子實(shí)體等的使用量應(yīng)比上述推薦量低 5-10倍。 2、向離心管中加入1 ml 65℃預(yù)熱的真菌裂解液1（FLB1），并用移液器充分吹打混勻。 3、65℃孵育5-30 min，其間吹打混勻2-3次。 4、室溫12,000 rpm離心3 min。 5、將不超過(guò)750 µl的上清液轉(zhuǎn)移到新離心管中。 注：上清液中偶有少量細(xì)小懸浮物，對(duì)后續(xù)操作無(wú)影響，無(wú)需特殊處理。 6、在上清液中加入等體積的真菌裂解液2（FLB2），上下顛倒30 s充分混勻，溶液將呈白色渾濁狀。 7、冰浴5-10 min。 8、室溫12,000 rpm離心3 min，轉(zhuǎn)移上清到新的1.5 ml 離心管中。 9、加入0.2 ml氯仿，劇烈振蕩30 s充分混勻。 10、室溫12,000 rpm離心3 min，小心轉(zhuǎn)移不超過(guò)600 µl的上清液到新的1.5 ml離心管中，注意避免觸及兩相交界面的白色 膜狀物。 11、加入1.5倍體積的膜結(jié)合液（MB），上下顛倒30 s混勻，分次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。 12、每次轉(zhuǎn)移700-800 µl混合液后，室溫放置5-10 min。 13、室溫12,000 rpm離心1 min，棄除收集管中的廢液。 14、將剩余的樣品加到離心吸附柱式中，重復(fù)第12-14步的操作。 15、加入700 µl的通用漂洗液（WB），室溫12,000 rpm 離心1 min，棄除收集管中的廢液。 16、加入300 µl的通用漂洗液（WB），室溫12,000 rpm 離心30 s，棄除收集管中的廢液。 17、再次離心1 min去除殘留液體。 18、將離心吸附柱放置在一個(gè)新的1.5 ml離心管中，加入30-100 µl通用洗脫液（EB），室溫放置5 min。 19、離心1 min，收集真菌DNA溶液。 20、（可選步驟）重復(fù)洗脫一次，以獲得更多的DNA。 21、DNA溶液可立即使用，也可適量分裝后于-20℃長(zhǎng)期保存。
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