注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
土壤汞（S-Hg ）濃度檢測試劑盒測定意義：
土壤汞污染能夠通過食物鏈傳遞和富集，對植物、動物和人類健康產(chǎn)生威脅。礦山開發(fā)、工業(yè)加工、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生活垃圾常常造成土壤汞污染，因此評價和防止土壤重金屬污染常常需要測定土壤汞含量。
測定原理：
土壤經(jīng)消化后，汞以Hg2+離子形式存在；Hg2+能與二硫腙生成橙色絡(luò)合物，溶于三氯甲烷后，在490nm測定吸光度，即可計算S-Hg含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、可調(diào)式移液槍、100 目篩（可更小）、濃硫酸、濃鹽酸、濃硝酸、三氯甲烷和蒸餾水。
試劑組成和配制：
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1 支，4nmol/mL Hg 標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。
試劑一：自備。提供50mL空試劑瓶。在該試劑瓶中加入26mL蒸餾水，18mL濃鹽酸，6mL 濃硝酸，混勻，4℃避光保存。
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加46mL蒸餾水充分溶解。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加5.5mL蒸餾水充分溶解。
試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加2.6mL蒸餾水充分溶解。
試劑五：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加13mL蒸餾水充分溶解。
試劑六：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加50mL三氯甲烷充分溶解。
S-Hg 測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到490nm，三氯甲烷調(diào)零。
2. 樣品管：風(fēng)干的土壤，過100目篩后精確稱取0.1g左右，裝入EP管；加入1 mL試劑一，充分混勻后沸水浴消化60min。取出冷卻后室溫8000g 離心10min， 吸取100μL上清液加入 新的EP管（≥2.5 mL）；再先后加入900μL 蒸餾水和100μL 濃硫酸，混勻；最后加入900μL試劑二，混勻后40℃水浴24h，期間震蕩數(shù)次。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，加入100μL標(biāo)準(zhǔn)液，900μL蒸餾水和100μL濃硫酸，混勻；最后加入900μL試劑二，混勻后40℃水浴24h，期間震蕩數(shù)次。
4. 于樣品管和標(biāo)準(zhǔn)管分別加入100μL試劑三，震蕩至無色；開蓋靜置30min，期間搖蕩數(shù)次，以排出氣體。
5. 加入50μL試劑四，充分混勻后靜置5min；加入250μL試劑五，蓋緊后震蕩至少1min，
靜置10min以分層。
6. 心吸取100μL下層溶液，加入1mL試劑六，震蕩使無色，靜置10 min以分層。
7. 小心吸取700μL下層溶液，加入1mL玻璃比色皿，于490nm 處比色，記錄各管吸光值。分別記為A樣品管和A標(biāo)準(zhǔn)管。
注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
S-Hg 濃度計算公式：
S-Hg（n mol Hg/g）= [C 標(biāo)×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管]×V 總÷V 樣÷W
= 40×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管÷W
C 標(biāo)：標(biāo)準(zhǔn)液濃度，4 nmol/mL Hg；V 總：上清液總體積，1mL；W：土樣質(zhì)量，g；V 樣：加入上清液體積，100μL=0.1mL。
注意事項：
1、試劑一有刺激性氣味，易揮發(fā)，實驗過程中應(yīng)注意佩戴口罩和手套，使用完立即蓋好蓋
子，以免試劑不夠；
2、測定過程中需加入濃硫酸，加濃硫酸時需注意，避免濺到皮膚或眼睛上；
3、靜置分層后，用 1mL移液槍，排除空氣后，輕輕插入下層溶液中，緩慢吸取下層溶液。
