注意：正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
土壤全鐵試劑盒可見分光光度法測定意義
鐵元素是一種十分重要的植物營養(yǎng)元素，土壤中鐵含量直接影響著植物吸收利用以及生長代謝。
測定原理
在 pH2-9范圍內(nèi)，鹽酸羥胺將三價(jià)鐵轉(zhuǎn)化為二價(jià)鐵，與鄰菲羅琳反應(yīng)生成橙紅色配合物，在510nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿。
試劑組成和配制
提取劑：粉劑×1 瓶，4℃保存。
提取液：液體 100mL×2 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存。
樣本處理
新鮮土樣風(fēng)干，過100目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：提取劑質(zhì)量(g)為 1：4 的比例（建議稱取約0.1g土樣，加入0.4g提取劑）緩慢加入提取劑于坩堝中，邊加邊攪拌均勻，然后在馬弗爐中550℃熔融10min，然后在920℃熔融30min，趁熱取出坩堝，將熔融物轉(zhuǎn)入燒杯，邊攪拌邊加4mL提取液，必要時(shí)加蓋，防止溶液濺出，溶解30min 后，5000g ，25℃離心10min，取上清液待測。
測定操作表
|
| 空白管 | 測定管 |
| 樣本（μL） |
| 100 |
| 試劑一（μL） | 100 | 100 |
| 試劑二（μL） | 300 | 300 |
| 試劑三（μL） | 200 | 200 |
| H2O（μL） | 400 | 300 |
| 充分混勻，25℃靜置 20min | ||
| 于1mL玻璃比色皿，蒸餾水調(diào)零，測定510nm處吸光值 A，分別記為A空白管和A測定管， △A=A測定管-A空白管 | ||
計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.1569x -0.0173，R2=0.9992
全鐵含量（mg/kg）=（△A+0.0173）÷ 0.1569×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）
= 254.94×（△A+0.0173）÷W
V 反總：反應(yīng)總體積，1mL；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.1mL；V 樣總：加入提取液體積，4mL，W：樣本質(zhì)量，g
