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HIV-2 前病毒 PCR 試劑盒

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HIV-2 前病毒 PCR 試劑盒主要流行于西非,其患者血漿中病毒 RNA 水平一直以來是評(píng)判抗病毒治療效果或預(yù)測疾病進(jìn)展的重要指標(biāo)。但是,經(jīng)抗病毒治療后血漿 HIV-2 RNA  已達(dá)到基線水平感染者的血液、精液或淋巴結(jié)中仍可以檢測到 HIV-2 前病毒 DNA 的存在,構(gòu)成病毒儲(chǔ)藏庫,對清除 HIV-2病毒構(gòu)成嚴(yán)重阻礙。所以在病毒載量已經(jīng)檢測不到的情況下,HIV-2 前病毒DNA 水平可以作為除T細(xì)胞計(jì)數(shù)和病毒載量之外的另一標(biāo)志物。因此檢測HIV-2 前病毒 DNA 具有重要意義。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

1. 即開即用,用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增 HIV-2 前病毒,與其他病毒沒有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼容。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次核酸釋放劑試用裝,其使用手冊可以從本公司網(wǎng)站核酸釋放劑或產(chǎn)品編號(hào)  61202  下載。

 

如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在  200μL  水中加  10μL HIV-2 前病毒 PCR 陽性對照的 10000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用 200μL 水。提取結(jié)束后最后得到 200μL 模板 DNA每個(gè)樣品)

放冰上待用,溶解 DNA 沉淀的溶液不能少于 200μL,否則 PCR 抑制物很可能會(huì)抑制  PCR。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)40μL 體系

 

N+2 個(gè)樣品,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰性對照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分

 

 

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