- Caspase家族活性的檢測(cè)
Caspase家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過(guò)程中起著非常重要的作用。在正常狀態(tài)下， Caspase家族都以無(wú)活性的酶原(30～50kD)形式表達(dá)，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)Caspase可以被蛋白酶裂解，大亞基和小亞基形成活化的Caspase 。一些Caspase活化后可以次序激活其他Caspase形成Caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)，促發(fā)細(xì)胞凋亡。在目前已知的14種Caspase中，Caspase-3、8和9與凋亡的關(guān)系最為密切，在細(xì)胞凋亡中起執(zhí)行凋亡的作用。將Caspase序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)，當(dāng)該底物被特定的caspase剪切后，發(fā)色基團(tuán)即游離出來(lái)，可通過(guò)酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)（λ=405nm 或400nm）測(cè)定其吸光值，考察caspase的活化程度。
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