產(chǎn)品及特點(diǎn)
本試劑盒可用于檢測(cè)食品或其他材料中是否有鱷魚的成分�，F(xiàn)代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性，因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無(wú)法對(duì)食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時(shí)部分食材還有致敏性，因此基于基因檢測(cè)的快速靈敏的食材來(lái)源檢測(cè)技術(shù)將對(duì)食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本產(chǎn)品就是為滿足這一需求根據(jù)探針法qPCR原理開發(fā)的產(chǎn)品，它具有下列特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。
2.根據(jù)鱷魚DNA保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物和探針，能專一性地檢測(cè)出樣品中的鱷魚成分，但不能檢測(cè)其他非鱷魚成分。
3.提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4.一管式閉管操作，降低了交叉污染。
5.快速，整個(gè)檢測(cè)過程（按一個(gè)樣品計(jì)）所需時(shí)間僅為2.0小時(shí)。
6.對(duì)混合樣品中鱷魚成分的檢測(cè)下限為0.01%，對(duì)樣品中鱷魚成分的核酸檢測(cè)下限為0.1ng/µL。
7.本產(chǎn)品既可以定性，又可以定量。定量時(shí)其線性范圍至少有5個(gè)數(shù)量級(jí)。
8.本只能用于科研，足夠50次20uL體系的熒光定量PCR。
規(guī)格及成分
2×Probe qPCR MagicMix90408500uL（本色蓋）
熒光PCR專用模板稀釋液1807011mL（紅蓋）
鱷魚源性成分探針法qPCR
引物探針混合液 yp15-169150uL（棕色管）
鱷魚源性成分探針法qPCR
陽(yáng)性對(duì)照（1×10E7拷貝/uL）pd16950uL（黃蓋）
自備試劑：DNA模板
使用方法：
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以10E1-10E6拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1.標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為6，5，4，3，2，1。
2.用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR專用模板稀釋液，最好用帶芯槍頭，下同）。
3.在6號(hào)管中加入5μL陽(yáng)性對(duì)照（濃度為1×10E7拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4.換槍頭，在5號(hào)管中加入5μL 1×10E6拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5.換槍頭，在4號(hào)管中加入5μL 1×10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6.重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
7.如果有N個(gè)樣品，最好設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）�？梢杂�10μL 第4號(hào)稀釋液（第6步所得）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為樣本制備PC。另外用水作為樣本制備NC。
8.用自選方法純化樣品的DNA，本擴(kuò)增試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)細(xì)菌DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20μL體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9.如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照（用水做模板），6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照（用水做模板），1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照（可直接用第6步所得的第4號(hào)稀釋液）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后最后加）
四：略
五、數(shù)據(jù)處理
11.如果把本試劑盒用于定量檢測(cè)，則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的log值為橫軸，以Ct值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的Ct值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品DNA濃度的log值，再推算出其濃度。
如果把本試劑盒用于定性檢測(cè)，只判斷陽(yáng)性或陰性，則陰性對(duì)照Ct必須大于或等于40。陽(yáng)性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng)，有典型擴(kuò)增曲線，Ct值應(yīng)該小于或等于35。對(duì)待測(cè)樣品，如果其Ct大于或等于40則為陰性，如果小于或等于35則為陽(yáng)性。如果在35-40之間，則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的Ct值如果大于或等于40則為陰性，如果小于40，則為陽(yáng)性。
我要詢價(jià)
*聯(lián)系方式：
(可以是QQ、MSN、電子郵箱、電話等，您的聯(lián)系方式不會(huì)被公開)
*內(nèi)容：
