簡介
細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇,同時蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽,導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱,甚至出現(xiàn)一些假陰性染色結(jié)果。所以要求在進(jìn)行免疫組化染色時,需要先進(jìn)行抗原修復(fù)或暴露,即將固定時分子之間所形成的交聯(lián)破壞,而恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。從而提高抗原的檢出率,降低背景染色, 提高檢測的準(zhǔn)確性。
檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(Citrate Antigen Retrieval solution)是一種常用的抗原修復(fù)液,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)?梢杂行コ╊惞潭ㄔ劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。
通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理?乖迯(fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時,考慮進(jìn)行抗原修復(fù)。
編號: Y02-02001
規(guī)格: 1L(粉劑)
保存方法:常溫保存。
抗原修復(fù)方法:
方法 1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài) 15min,自然冷卻至室溫。
方法 2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火 5min,; 3min,中火 5min,自然冷卻至室溫。
方法 3:高壓修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于高壓鍋,上汽后修復(fù) 2-5min,然后將高壓鍋置入涼水中,減壓至正常后取出玻片。
注意事項:
1. 試劑溶解后盡快使用,如有剩余應(yīng)密封后 2-8℃保存,防止污染。
2. 脫蠟水化的切片,應(yīng)避免因切片干燥,而至非特異性染色。
3. 熱修復(fù)操作時務(wù)必謹(jǐn)慎,當(dāng)心燙傷。
4. 熱修復(fù)時間過長易導(dǎo)致脫片,請注意控制時間。