神經(jīng)元是通過電和化學(xué)信號處理和傳輸信息的可電刺激細胞。 化學(xué)信號通過突觸與其他細胞的專門連
接發(fā)生。 神經(jīng)元相互連接形成網(wǎng)絡(luò)。 神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)的核心組成部分， 包括大腦、 脊髓和周圍神經(jīng)節(jié)。
小鼠神經(jīng)干細胞 （NSC） 成神經(jīng)元細胞誘導(dǎo)分化試劑盒， 包含神經(jīng)干細胞成神經(jīng)元誘導(dǎo)分化基 礎(chǔ)培養(yǎng)基和其他添加物組成。 該產(chǎn)品已經(jīng)成功應(yīng)用于小鼠神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元的分化。
注意： 本產(chǎn)品僅提供給進一步科研使用， 不可用于臨床治療等其他用途。
| 試劑盒成分 | 貨號 | 體積 |
| Basal Medium For Cell Culture 細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 03011 | 98 mL |
| Supplements For Mouse NSC Neurogenic Differentiation 小鼠神經(jīng)干細胞成神經(jīng)元誘導(dǎo)分化添加物 | 04081 | 2 mL |
質(zhì)量控制
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通過細菌、 真菌、 支原體、 內(nèi)毒素檢測。 通過滲透壓、 pH 檢測。 通過產(chǎn)品性能檢測。 |
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詳情見 《產(chǎn)品檢測報告》 。 |
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處理原則 |
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嚴(yán)格的無菌環(huán)境。 務(wù)必保證實驗室整體和操作區(qū)域的清潔。 規(guī)范的操作方式。 請按照產(chǎn)品說明書描述的方式操作， 嚴(yán)格控制變量， 做好對照實驗。 各成分需按照保存條件妥善存放， 并盡快使用。 若短期內(nèi)無法用完整套培養(yǎng)基， 應(yīng)按套裝內(nèi)各成分體積比例分批配制并分裝保存。 |
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產(chǎn)品穩(wěn)定性及保存條件 |
1. 套裝內(nèi)所有成分均需避光保存。
2. 套裝內(nèi)基礎(chǔ)培養(yǎng)基需置于 4℃冰箱保存， 保質(zhì)期為 1 年； 其他成分需置于-20℃保存， 保質(zhì)期為 2 年。
3. 配制后的完全培養(yǎng)基， 需放置 4℃保存， 保質(zhì)期為 1 個月； 若能保證培養(yǎng)條件穩(wěn)定， 容器密封性能良
好， 避免冷熱交替， 則保質(zhì)期可適當(dāng)延長， 但不得超過 45 天。
4. 所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用； 過期的成分可能嚴(yán)重影響培養(yǎng)效果。
所需材料
小鼠神經(jīng)干細胞成神經(jīng)元細胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基試劑盒
清潔、 無菌、 質(zhì)量穩(wěn)定的一次性耗材 （移液管、 移液器吸頭、 離心管等）
潔凈的封口膜、 鋁箔紙等避光材料
操作步驟
1. 配制前至少 30 min， 將套裝中 小鼠神經(jīng)干細胞成神經(jīng)元誘導(dǎo)分化添加物放置于室溫， 直至完
全融化。
2. 上下顛倒或輕彈試劑管以混勻試劑。
3. 用 75%醫(yī)用酒精仔細擦拭所有成分外包裝。 在超凈臺內(nèi)打開包裝。
4. 將 小鼠神經(jīng)干細胞成神經(jīng)元誘導(dǎo)分化添加物全部加入 細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。
5. 擰緊基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶蓋， 輕柔并充分搖勻。
注意： 若短期內(nèi)無法用完全部培養(yǎng)基， 我們建議分批配制； 請按照套裝內(nèi)各成分比例， 配制所需量； 但剩余的成分必須嚴(yán)格按照各自的保存條件妥善保存， 并且不可多次凍融。
6. 用封口膜密封瓶口， 用鋁箔紙包裹瓶身， 并標(biāo)注名稱、 配制日期等信息。
注意： 小鼠神經(jīng)干細胞成神經(jīng)元細胞誘導(dǎo)分化試劑盒內(nèi)的所有成分都嚴(yán)格控制無菌， 一般情況 下我們不建議再次除菌。 若配制過程有污染風(fēng)險， 可將完全培養(yǎng)基過濾除菌。
誘導(dǎo)分化操作規(guī)程
所需材料
小鼠神經(jīng)干細胞成神經(jīng)元細胞誘導(dǎo)分化試劑盒
Phosphate-BufferedSaline (1×PBS)
Poly-L-lysine （PLL）
Laminin
無菌超純水
操作步驟
培養(yǎng)器皿表面 Poly- L-lysine （PLL） /Laminin 鋪板
1. 細胞分化實驗前至少一天， 進行 PLL/Laminin 鋪板準(zhǔn)備。
2. 使用無菌超純水稀釋 PLL 至終濃度為 15 μg/mL 備用。
3. 向培養(yǎng)板中加入適量步驟 2 中的 PLL 溶液， 搖勻至均勻覆蓋底面。
4. 室溫放置 30 min。
5. 吸去 PLL 溶液， 使用適量的無菌水清洗一次。
6. 用無菌超純水稀釋 Laminin 至終濃度為 15 μg/mL 備用。
7. 向培養(yǎng)板中加入步驟 6 中的 Laminin 溶液， 搖勻至均勻覆蓋底面， 封口膜封口后放置 4℃過夜備用。
注意： 包被后的培養(yǎng)板， 在無菌和 Laminin 不蒸干的條件下， 可以在 4℃存放一周， 請于一周內(nèi)使
用。
8. 使用前將 Laminin 吸去， 并用 PBS 清洗一次， 晾干后備用。
小鼠神經(jīng)干細胞的培養(yǎng)操作規(guī)程
1. 將完全培養(yǎng)基預(yù)熱至 37℃。
2. 準(zhǔn)備 15 mL 或其他型號離心管， 收集培養(yǎng)容器中的培養(yǎng)基。
3. 用小鼠神經(jīng)干基礎(chǔ)培養(yǎng)基 （若有） 洗滌細胞 1 次， 注意動作輕柔， 清洗全面， 收集基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
4. 收集的所有細胞懸液以 160×g 離心 5 min。
5. 離心后去除上清。 加入 1 mL 完全培養(yǎng)基， 輕柔吹打細胞沉淀約 15~20 次， 充分吹散、 混勻。
注意： 吹打動作不可劇烈， 避免產(chǎn)生大量氣泡， 否則可能損傷和損失細胞。
6. 將細胞按(2.5~4) ×104 個活細胞/cm2 接種至適宜的培養(yǎng)容器內(nèi)。
7. 搖勻細胞， 放入 37℃、 5%CO2、 飽和濕度的 CO2 培養(yǎng)箱中。
8. 傳代次日， 觀察細胞狀態(tài), 可適量添加新鮮培養(yǎng)基。
注意： 若傳代后發(fā)現(xiàn)較多細胞死亡， 則應(yīng)進行換液操作 （詳見傳代步驟 2~4， 離心后去除上清， 用 1 mL 完全培養(yǎng)基輕輕吹散沉淀幾次后接種即可， 請勿重復(fù)吹打）
神經(jīng)元細胞誘導(dǎo)分化操作規(guī)程
1. 將神經(jīng)干細胞按 2 x104 個細胞/cm2 鋪至經(jīng)過 PLL/Laminin 包被的六孔板中。
2. 搖勻細胞， 放入 37℃、 5%CO2、 飽和濕度的 CO2 培養(yǎng)箱中。
3. 2 天后， 更換 小鼠神經(jīng)干細胞成神經(jīng)元細胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基。
4. 之后， 每 3 天更換一次新鮮誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基。
5. 在第 7 天進行相關(guān)分析或提取 RNA 或蛋白進行后續(xù)實驗。
