產品描述：
我司生產的大腸桿菌蛋白提取液采用獨特的中性裂解配方，從而最大限度的提高了后續(xù)提取蛋白的活性。使用該溶液從大腸桿菌中提取蛋白不需要超聲波破碎等復雜的操作步驟，溶液置于 4°C 可長期保存，使用方便。該溶液室溫30min 可破碎 95％以上的細胞，裂解后的溶液可直接通過Ni-NTA 等純化填料進行蛋白純化。該溶液既可適用于小量蛋白表達檢測，也適用于大量蛋白的表達純化試驗；既適用于純化可溶型蛋白，也適用于純化包涵體蛋白。
主要特征
♦ 單組分溶液，使用方便
♦ 裂解迅速，蛋白不會變性
♦ 適用于小量或大規(guī)模蛋白表達
♦ 適用于可溶性蛋白和包涵體純化
應用：大腸桿菌的裂解和包涵體純化。
儲存：置于 4°C 可保存 2 年。
操作方法
♦ 可溶型蛋白操作方法（1 ml 菌液為例）
1. 8,000rpm 室溫離心 3min 后，棄上層培養(yǎng)基，留取管底部菌體（盡量棄除掉培養(yǎng)基）。
2. 加入 200 μl（重懸體積不得少于 50 μl）大腸桿菌蛋白提取液重懸菌體，用吸頭吹打至無可見細胞團塊。
注：為降低溶液粘度，可加入 Benzonase 核酸內切酶至 0.25U/μL；加入終濃度為 1 mg/ml 的溶菌酶效果更佳。
3. 置于室溫孵育 30-60min，期間輕彈離心管數(shù)次以加速裂解。
4. 裂解完成后 13,000rpm 于 4℃離心 15-20min，將上清轉移至新的容器中，溶液可直接進行下一步純化或檢測試驗。
♦ 包涵體蛋白操作方法
5. 上述步驟 4 中，棄上清，保留沉淀組分，用 200 μl 的大腸桿菌蛋白提取液重懸沉淀。
6. 加入溶菌酶至終濃度 1 KU/ml，混合均勻，室溫孵育 10min。
7. 加入 800 μl 的滅菌水混合均勻。
8. 13,000 rpm 室溫離心 15-20min，棄上清后用 900 μl 滅菌水重懸沉淀，然后加入 200 μl 大腸桿菌蛋白提取液，混合均勻。
9. 13,000rpm 室溫離心 15-20min，重復步驟 8 三至五次。
10. 將沉淀溶解于變性溶液中，進行下一步純化或復性試驗
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