注 意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
硝態(tài)氮是植物最主要的氮源。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況，可作為土壤氮肥的指標(biāo)。測定植物體內(nèi)的硝態(tài)氮含量，不僅能夠反映出植物的氮素營養(yǎng)情況，而且對鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質(zhì)也有重要的意義。
測定原理：
在濃酸條件下，NO3-與水楊酸反應(yīng)，生成硝基水楊酸，硝基水楊酸在堿性條件下（PH>12）呈黃色，在一定范圍內(nèi)，其顏色深淺與含量成正比，可比色測定計(jì)算得硝態(tài)氮含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
蒸餾水、天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制：
試劑一：粉劑×2瓶，4℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加2mL濃硫酸充分溶解。
試劑二：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1支，4℃保存。
樣本處理：
按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，室溫勻漿后置于90℃恒溫水浴鍋中浸提30min，期間不斷晃動或者置于90℃恒溫?fù)u床中振蕩提取30min，待冷卻后于25℃，12000g離心15min，取上清待測。（深色植物勻漿后加入約3mg試劑三后再提�。�
測定操作表：
|
| 空白管 | 測定管 |
| 樣本（μL） |
| 30 |
| 蒸餾水（μL） | 30 |
|
| 試劑一（μL） | 60 | 60 |
| 充分混勻，25℃靜置30min | ||
| 試劑二（μL） | 1425 | 1425 |
| 混勻，渦旋振蕩，使出現(xiàn)的沉淀充分溶解，取1mL于1mL玻璃比色皿中測定410nm處吸光值A，△A=A測定管-A空白管 | ||
注意：空白管只需測定一次。
計(jì)算公式：
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0156x+0.0073，R2=0.9997
NO3—— N含量（mg/kg鮮重）=（△A-0.0073）÷ 0.0156÷（W÷V樣總）
=64.1×（△A-0.0073）÷W
V樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，g
注意事項(xiàng)：
1. 試劑一配制好后盡快使用，4℃可保存一周。
2. 試劑一和試劑二均具有強(qiáng)腐蝕性，操作時(shí)需做好防護(hù)措施。
3. 最低檢出限為2μg/g。
