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Sau DNA 聚合酶

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Sau DNA聚合酶(Sau DNA Polymerase)是具有鏈置換活性的DNA恒溫?cái)U(kuò)增聚合酶,主要應(yīng)用于RPA重組酶擴(kuò)增。重組酶UvsX與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列;一旦引物定位了同源序列,就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng),Sau DNA聚合酶啟動(dòng)DNA合成,對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增, 被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進(jìn)一步替換。
Sau DNA 聚合酶來源于金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) DNA 聚合酶(Sau) I 基因, 是將其N端的1-293個(gè)AA截去而得。該酶保留了DNA聚合酶 的 5´-3´ 聚合酶活性,但是缺失了 5´-3´ 和3‘-5’核酸外切酶活性,可用于重組酶擴(kuò)增。

應(yīng)用

  • 隨機(jī)引物法標(biāo)記
  • cDNA 第二條鏈的合成
  • 單個(gè) dA 的加尾
  • 鏈置換的 DNA 合成

活性定義

在37℃條件下,30min內(nèi)參入10nmol酸性不容物定義為1個(gè)活性單位。

1X Sau Reaction Buffer

50 mM NaCl ,10 mM Tris-HCl (Ph7.5) , 10 mM MgCl2 , 1 mM DTT。

儲(chǔ)存

-20℃可保存2年,避免反復(fù)凍融。

熱失活

75°C,20min。
 
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