| 末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）是一種不依賴于模板的DNA聚合酶，催化脫氧核苷酸結(jié)合到DNA分子的3’羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈DNA分子 均可作為TdT的底物，加尾長度可達5~300nt。本酶經(jīng)電子重構(gòu)架技術(shù)篩選，使其可以在45°C高溫下反應(yīng)，從而避免因DNA二級結(jié)構(gòu)造成的加尾效 率下降。優(yōu)化的活性中心結(jié)構(gòu)，使其對模板底物結(jié)合能力更強，底物加尾比例更高。該末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）廣泛用于DNA的3’末端添加同聚物、利用修飾堿基（如 ddNTP，DIGdUTP）標記DNA 3’末端、TdT介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標記技術(shù)（細胞凋亡的原位檢測）等試驗。 | |||||||||
組分 | |||||||||
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應(yīng)用 | |||||||||
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活性定義 | |||||||||
| 37℃ 60分鐘內(nèi)，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3’羥基末端中所需的酶量定義為1個活性單位 | |||||||||
儲存 | |||||||||
| -20℃可保存3年。 | |||||||||
熱失活 | |||||||||
| 75°C 20min。 | |||||||||
注意事項 | |||||||||
| 1、適量EDTA可使Terminal Transferase的活性喪失。 2、金屬離子螯合劑，較高濃度的銨根離子、氯離子、碘例子和磷酸根離子均對Terminal Transferase活性具有抑制作用。 | |||||||||
功能測試（該實驗結(jié)果來自實驗室，未經(jīng)允許，不得轉(zhuǎn)載） | |||||||||
| 1. TDT不同底物的加尾效率分析 | 2. 不同酶量和不同溫度下加尾長度分析 | ||||||||
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