產(chǎn)品概述 product description
蛋白脫鹽柱是一種方便的蛋白脫鹽工具，只需要離心操作即可以用來對蛋白質(zhì)液體樣本進行脫鹽，還可以用于蛋白質(zhì)、抗原、抗體、酶和微生物的濃縮純化。也可以用來對蛋白質(zhì)樣品中的鹽分、糖類、核酸、非水溶劑及其他一些低分子量物質(zhì)進行去除和緩沖液置換。還可以用來分離蛋白質(zhì)標記時未結(jié)合上的游離標記物。 蛋白脫鹽柱使用蛋白質(zhì)低吸附性的BBproExtraTM再生纖維素過濾膜制造，具有快速、方便、回收率高的特點，可替代并優(yōu)于透析法脫鹽及蛋白沉淀法蛋白濃縮。 蛋白脫鹽柱有多種規(guī)格可供選擇。 可以提供針對動物細胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、液體、土壤等不同樣本的蛋白提取試劑盒，包含用于非雙向電泳和雙向電泳等不同下游應用的試劑盒以及含去垢劑成分和不含去垢劑成分的蛋白提取試劑盒，總計300多種蛋白提取試劑盒可供選擇。還可以提供針對動物、植物等不同樣本的細胞核、線粒體、溶酶體、葉綠體等不同細胞器的提取試劑盒。
保存溫度
室溫
注意事項
1.脫鹽柱配有2個微量離心套管。
2.在操作過程中，一個可用于收集濾出液，而另一個用于回收脫鹽后的樣本。
3.用過的脫鹽管要保持過濾膜濕潤，不能干掉。
2.在操作過程中，一個可用于收集濾出液，而另一個用于回收脫鹽后的樣本。
3.用過的脫鹽管要保持過濾膜濕潤，不能干掉。
有效期
一年
產(chǎn)品特點
1、 高回收率 >90%；
2、 垂直結(jié)構的膜減少了濃差極化，加快離心速度，快達 5 分鐘；
3、 熱密封膜將下游溶出物污染可能性降到最低；
4、 100% 完整性檢測確保性能可靠；
5、 透明外殼和體積刻度方便樣品察看；
6、 直接吸取樣品減少處理步驟；
7、 高濃縮倍數(shù)：高達80–100 倍
2、 垂直結(jié)構的膜減少了濃差極化，加快離心速度，快達 5 分鐘；
3、 熱密封膜將下游溶出物污染可能性降到最低；
4、 100% 完整性檢測確保性能可靠；
5、 透明外殼和體積刻度方便樣品察看；
6、 直接吸取樣品減少處理步驟；
7、 高濃縮倍數(shù)：高達80–100 倍
儀器準備
1.離心機；可容納1.5ml微量離心管的固定角度轉(zhuǎn)子離心機。
2.移液器
3.冰箱
2.移液器
3.冰箱
試劑準備
1.純水
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
2.吸頭
使用注意事項
1.不同的蛋白脫鹽的速度不同，有的需要長時間離心，有的則很快就好。和蛋白樣品純度，所用buffer類型，蛋白的濃度有關系。離心時要先短些時間，觀察一下脫鹽速度；
2.如果需要多次重復使用，離心速度不要太高；
3.重復使用時要仔細檢查管壁上有沒有裂紋；
4.脫鹽柱濃縮蛋白會有蛋白損失，樣品體積大就分批離心，盡可能不要離心時間太長
5.樣品里的雜質(zhì)如果可能盡量在離心前去除一些。
6.分子量小于5kD的溶質(zhì)可能只有部分被截留。2kD的樣品截留率大約只有40%。過濾膜的截留率取決于溶質(zhì)的分子大小和形狀。目的蛋白小于5kD的樣品不要使用脫鹽柱脫鹽。
7.濃縮液的樣本回收率低可能是由于吸附損失、過度濃縮，或樣本穿過濾膜而造成的。
8.吸附損失取決于溶質(zhì)濃度、疏水性、與過濾脫鹽管表面接觸的溫度和時間、樣本成分及pH。為了最大限度降低損失，離心后請立即回收脫鹽后的樣本。
9.如果樣本的起始濃度很高，請監(jiān)控離心過程，以免樣本過度濃縮。過度濃縮會導致沉淀，這也可能帶來樣本損失。
10.樣本有可能穿過濾膜，務必將每次的濾過液一直保留到脫鹽的樣品分析測試完成。
11.樣品蛋白最低起始濃度為25ug/ml。
12.加蛋白液或Buffer到脫鹽管時，可以用藍槍頭；但從脫鹽管底吸取脫鹽好的目的蛋白時，必須用黃槍頭；用槍頭伸入脫鹽管中時，必須防止碰到濾膜，以免戳破濾膜。
2.如果需要多次重復使用，離心速度不要太高；
3.重復使用時要仔細檢查管壁上有沒有裂紋；
4.脫鹽柱濃縮蛋白會有蛋白損失，樣品體積大就分批離心，盡可能不要離心時間太長
5.樣品里的雜質(zhì)如果可能盡量在離心前去除一些。
6.分子量小于5kD的溶質(zhì)可能只有部分被截留。2kD的樣品截留率大約只有40%。過濾膜的截留率取決于溶質(zhì)的分子大小和形狀。目的蛋白小于5kD的樣品不要使用脫鹽柱脫鹽。
7.濃縮液的樣本回收率低可能是由于吸附損失、過度濃縮，或樣本穿過濾膜而造成的。
8.吸附損失取決于溶質(zhì)濃度、疏水性、與過濾脫鹽管表面接觸的溫度和時間、樣本成分及pH。為了最大限度降低損失，離心后請立即回收脫鹽后的樣本。
9.如果樣本的起始濃度很高，請監(jiān)控離心過程，以免樣本過度濃縮。過度濃縮會導致沉淀，這也可能帶來樣本損失。
10.樣本有可能穿過濾膜，務必將每次的濾過液一直保留到脫鹽的樣品分析測試完成。
11.樣品蛋白最低起始濃度為25ug/ml。
12.加蛋白液或Buffer到脫鹽管時，可以用藍槍頭；但從脫鹽管底吸取脫鹽好的目的蛋白時，必須用黃槍頭；用槍頭伸入脫鹽管中時，必須防止碰到濾膜，以免戳破濾膜。
使用方法
清洗濃縮柱：
1. 用緩沖液或純水進行預清洗。也可先用0.1 M NaOH清洗，再用緩沖液或純水進行二次清洗。
2. 離心管中的過濾膜一旦潤濕后應避免變干。如果在預清洗后不是立即使用，則讓液體保留在濾膜上，直到使用。
濃縮使用方法：
操作步驟：
1. 將內(nèi)管插入所提供的一個微量離心管中。
2. 向內(nèi)管中加入不超過500 ul的樣本，并蓋上蓋子。
3. 將蓋好蓋子的濃縮管放入離心轉(zhuǎn)子中，讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中央；用一個類似的離心管平衡。
4. 以2000-10000 x g離心約10-30分鐘。
5. 離心結(jié)束后將整個濃縮管從離心機中取出，取出內(nèi)管。
6. 為了回收濃縮后的溶質(zhì)，將內(nèi)管倒過來插在另一個干凈的微量離心管中。放在離心機中，讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中央；用一個類似的離心管進行平衡。以1,000 x g離心2分鐘，使?jié)饪s后的樣本從濃縮內(nèi)管轉(zhuǎn)移到收集管中。濾液可以保存在收集管中。
脫鹽使用方法：
操作步驟：
1. 把樣品置于過濾裝置的儲液管中；
2. 如果樣品體積小于過濾裝置的最大體積，則可以把它稀釋到最大體積后再離心，這有助于更有效地除去鹽分；
3. 在特定的離心力下和推薦的時間進行離心；
4. 將濾過液從濾管中取出，放置一旁；
5. 加入水或緩沖液使樣品體積達到0.5ml；
6. 再次離心；
7. 取出濾過液，放置一旁；
8. 回收濃縮的已脫鹽樣品。
清洗和保存：
1. 使用后用水沖洗干凈；
2. 內(nèi)管加入超純水500µl，5000g離心5分鐘；
3. 凈內(nèi)管中的水，加入500µl 0.1M NaOH，5000g離心20分鐘；
4. 用0.1M NaOH 浸泡24小時；
5. 用水沖洗干凈；
6. 用無菌水浸泡2-8℃保存。
7. 外管用自來水洗凈后，用超純水沖洗干凈，晾干。
常見問題分析
1.蛋白脫鹽柱會損失蛋白嗎？
分子量小于3000 Da的蛋白質(zhì)或多肽樣品會穿透過濾膜，不適合用本脫鹽柱進行脫鹽。3000 -6000Da的蛋白質(zhì)會有少量損失。6000Da以上的蛋白質(zhì)損失很小。
2.膜會因為離心時間過長而變干么？
不會，因為脫鹽柱有死體積，總會有溶液殘留在濾管中。死體積大約10-20ul。
3.可以重復使用脫鹽柱么？
可以重復使用。如果使用、清洗、保存得當，可以反復使用多次。但是多次重復使用后過濾膜有破損風險，注意使用過程中盡量避免尖銳物品戳到膜。離心力不要過大。
分子量小于3000 Da的蛋白質(zhì)或多肽樣品會穿透過濾膜，不適合用本脫鹽柱進行脫鹽。3000 -6000Da的蛋白質(zhì)會有少量損失。6000Da以上的蛋白質(zhì)損失很小。
2.膜會因為離心時間過長而變干么？
不會，因為脫鹽柱有死體積，總會有溶液殘留在濾管中。死體積大約10-20ul。
3.可以重復使用脫鹽柱么？
可以重復使用。如果使用、清洗、保存得當，可以反復使用多次。但是多次重復使用后過濾膜有破損風險，注意使用過程中盡量避免尖銳物品戳到膜。離心力不要過大。
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