內(nèi)源性過氧化物酶強(qiáng)力封閉液(Enhanced Endogenous Peroxidase Blocking Buffer)主要用于免疫組化(Immunohistochemistry, IHC)、免疫細(xì)胞化學(xué)染色(Immunocytochemistry, ICC)以及原位雜交(In situ hybridization, ISH)時(shí)組織或細(xì)胞內(nèi)源性過氧化物酶的封閉。
內(nèi)源性過氧化物酶廣泛存在于一些細(xì)胞和組織中,包括血紅細(xì)胞、腎臟和肝臟組織等。從而導(dǎo)致利用過氧化物酶的方法進(jìn)行樣品檢測時(shí)會(huì)出現(xiàn)較高的背景,甚至出現(xiàn)假陽性結(jié)果。因此,細(xì)胞或組織樣品等在染色前宜使用適當(dāng)?shù)倪^氧化物酶封閉液進(jìn)行封閉,以消除內(nèi)源性過氧化物酶的干擾。
內(nèi)源性過氧化物酶強(qiáng)力封閉液的組分經(jīng)過反復(fù)測試和優(yōu)化,具有超強(qiáng)的過氧化物酶封閉效果。普通的過氧化氫溶液只能部分抑制過氧化物酶的活性,生產(chǎn)的內(nèi)源性過氧化物酶封閉液(P0100A)的效果要顯著優(yōu)于常規(guī)的過氧化氫溶液,而本產(chǎn)品則可以幾乎完全抑制過氧化物酶的活性,從而能更加充分地降低非特異性的背景染色。
圖1. 內(nèi)源性過氧化物酶強(qiáng)力封閉液對(duì)于過氧化物酶的封閉效果及比較。把HRP標(biāo)記的二抗按照1:50、1:100、1:200、1:500、1:1000、和1:2000稀釋后滴1微升至硝酸纖維素膜上(依次為上排第1-4個(gè)點(diǎn)和下排第1和第2個(gè)點(diǎn)),干燥后,用不同的封閉液進(jìn)行封閉,然后用DAB顯色液進(jìn)行顯色。上圖中可見對(duì)照組(Control)可以檢測到1:2000稀釋的點(diǎn),而競爭產(chǎn)品(Competitor)和常規(guī)過氧化氫(H2O2)封閉后都可以檢測到1:1000稀釋的點(diǎn),強(qiáng)力封閉液可以完全封閉各不同稀釋度的HRP標(biāo)記二抗。
本產(chǎn)品能強(qiáng)力封閉過氧化物酶從而有效降低染色背景,但不會(huì)削弱特異性的信號(hào),有時(shí)甚至能增強(qiáng)特異性的信號(hào)(參考圖2)。
圖2. 內(nèi)源性過氧化物酶強(qiáng)力封閉液用于Hela細(xì)胞Tubulin和Actin的免疫染色效果。未經(jīng)封閉的對(duì)照和使用本產(chǎn)品進(jìn)行封閉的Hela細(xì)胞樣品進(jìn)行Tubulin和Actin的免疫細(xì)胞染色(最終用DAB顯色)。圖中可見對(duì)于Tubulin的免疫細(xì)胞染色,本產(chǎn)品封閉后并不會(huì)削弱樣品的特異性染色效果。對(duì)于Actin的免疫染色有非常顯著的增強(qiáng)效果。
內(nèi)源性過氧化物酶強(qiáng)力封閉液使用便捷,可以直接使用,無須配制或稀釋。
一個(gè)包裝的本產(chǎn)品按照每個(gè)樣品需要使用100微升封閉液計(jì)算,共可以用于1000個(gè)樣品。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
P0100B | 內(nèi)源性過氧化物酶強(qiáng)力封閉液 | 100ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
4℃保存,至少一年有效。
注意事項(xiàng):
本產(chǎn)品已經(jīng)測試了多種抗體的免疫染色效果,都發(fā)現(xiàn)最終的染色效果和常規(guī)方法相當(dāng)或顯著改善。對(duì)于特定抗原的檢測,萬一使用本產(chǎn)品后出現(xiàn)染色效果欠佳的意外情況,可以嘗試使用內(nèi)源性過氧化物酶封閉液(P0100A)。
對(duì)于使用過氧化物酶檢測系統(tǒng)有困難的一些特殊情況,可以考慮嘗試使用堿性磷酸酶檢測系統(tǒng)。
本產(chǎn)品不含劇毒的甲醇,但還是對(duì)人體有刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。