產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品是專為犬骨髓間充質(zhì)干細(xì) 胞研制優(yōu)化的成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基試劑 盒，用于增強(qiáng)犬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞方 向誘導(dǎo)分化的能力。
在庫產(chǎn)品均通過生物安全檢 測(cè)和產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)，體系穩(wěn)定有效，現(xiàn)貨發(fā)送， 性價(jià)比高。專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)可提供最有 效的技術(shù)指導(dǎo)，保證售后品質(zhì)。
質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)： pH：7.2~7.4
內(nèi)毒素含量：＜10 EU/mL
生物安全：細(xì)菌、真菌、支原體檢測(cè)陰性
質(zhì)量檢測(cè)：誘導(dǎo)測(cè)試合格
運(yùn)輸方式：產(chǎn)品冰袋冷藏運(yùn)輸
檢驗(yàn)原理：茜素紅是一種廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)樣本檢 驗(yàn)的示鈣染劑，游離的鈣離子不能與茜素紅形成 紅色沉淀，而固化的鈣質(zhì)結(jié)節(jié)則能被染成紅色。 干細(xì)胞在誘導(dǎo)培養(yǎng)基作用下，會(huì)逐漸向骨細(xì)胞方 向分化，產(chǎn)生明顯的泌鈣反應(yīng)，形成鈣鹽結(jié)晶或 鈣質(zhì)結(jié)節(jié)，均能被茜素紅染色。
使用說明
1. 成骨誘導(dǎo)分化操作
1.1 明膠包被培養(yǎng)器皿 干細(xì)胞培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間后，可能會(huì)出現(xiàn)脫壁卷 邊或漂浮現(xiàn)象，建議使用0.1%明膠溶液對(duì)培養(yǎng)器 皿進(jìn)行包被。準(zhǔn)備合適的培養(yǎng)器皿，取適量明膠 覆蓋底面，37°C靜置30 min，吸取晾干即可使用。
1.2 接種干細(xì)胞 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞， 按 照 2.0×10e4 cells/cm2 的細(xì)胞密度接種至包被后的培養(yǎng)器皿中， 于 37℃，5% CO2 培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度 60~70%，棄掉上清，加入成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基。
1.3 細(xì)胞分化誘導(dǎo) 于37℃，5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約14~21天， 每2~3天換液一次，并注意觀察細(xì)胞形態(tài)變化。 根據(jù)細(xì)胞鈣鹽結(jié)晶析出和鈣質(zhì)結(jié)節(jié)形成的情況， 決定終止細(xì)胞誘導(dǎo)的時(shí)間，并進(jìn)行染色鑒定。
2. 染色鑒定
2.1 細(xì)胞固定 吸去培養(yǎng)基使用適量1×PBS清洗一次，棄去 后取適量4%中性甲醛溶液覆蓋培養(yǎng)器皿底面，室 溫固定30~60 min，棄去固定液再使用1×PBS清洗 兩次。
2.2 茜素紅染色 加入適量茜素紅染色液染3~5 min，吸走茜 素紅染色液，用1×PBS清洗兩次，并加入適量1× PBS避免細(xì)胞干燥。
2.3 誘導(dǎo)評(píng)估 顯微鏡下觀察成骨染色效果，并進(jìn)行圖像采 集和誘導(dǎo)評(píng)估。誘導(dǎo)成功時(shí)，鈣質(zhì)結(jié)節(jié)與茜素紅 染料結(jié)合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。
NOTE: 干細(xì)胞的成骨分化水平因細(xì)胞類型、細(xì)胞供體來 源，培養(yǎng)條件、細(xì)胞代次、細(xì)胞狀態(tài)和分化時(shí)間等因素而 異。
