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人瘢痕成纖維細(xì)胞永生化

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 細(xì)胞詳述

瘢痕疙瘩是一種具有浸潤(rùn)生長(zhǎng)特性的病理性瘢痕,治療后復(fù)發(fā)率高。成纖維細(xì)胞是瘢痕疙瘩形成與增生的效應(yīng)細(xì)胞,瘢痕疙瘩組織學(xué)特點(diǎn)為大量成纖維細(xì)胞增生。

該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

注意事項(xiàng):收到細(xì)胞后第一次傳代建議1:2傳代,充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,不能用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。

細(xì)胞特性

1)細(xì)胞來(lái)源于手術(shù)切除的瘢痕疙瘩組織。

2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:成纖維樣細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

產(chǎn)品的運(yùn)輸和保存

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

 

名稱

體積

濃度

保存條件

原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500ml

4℃、避光

原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50ml

終濃度10%

-20℃、避光

雙抗(青霉素/鏈霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

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