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重組λ蛋白磷酸酶

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產(chǎn)品編號(hào)bs-47228P
英文名稱Recombinant Lambda Protein Phosphatase, His
中文名稱重組λ蛋白磷酸酶
別    名Lambda Protein Phosphatase; Protein Phosphatase, Lambda, Recombinant, E. coli; Recombinant Lambda Protein Phosphatase, His  λ 蛋白磷酸酶;
理論分子量26kDa
檢測(cè)分子量26 kDa
性    狀Liquid
濃    度>0.5 mg/ml
物    種N/A
序    列1-221/221
純    度>95% as determined by SDS-PAGE
純化方法AC
內(nèi)毒素Not analyzed
表達(dá)系統(tǒng)E.coli
活性Yes
標(biāo)簽His
緩 沖 液50 mM This-HCl (pH=7.5) with 100 mM NaCl, 0.1 mM MnCl2, 0.1 mM EGTA, 2 M dithiothreitol (DTT), 0.01% Brij35 and 50% (v/v) Glycerol.
保存條件Stored at -70℃ or -20℃. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
產(chǎn)品介紹產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
重組λ蛋白磷酸酶 (Recombinant Lambda Protein Phosphatase) 是一種錳離子(Mn2+)依賴的重組表達(dá)純化的磷酸蛋白酶,可以對(duì)磷酸化的絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和組氨酸殘基進(jìn)行脫磷酸反應(yīng)。重組λ蛋白磷酸酶是大腸桿菌表達(dá)的帶His標(biāo)簽的含有221個(gè)氨基酸殘基重組蛋白。
重組λ蛋白磷酸酶可以用于蛋白的去磷酸化,從而可以用于研究蛋白磷酸化與其活性和結(jié)構(gòu)的關(guān)系,以及驗(yàn)證蛋白磷酸化位點(diǎn)抗體的特異性等。
酶活性單位定義:在30℃ pH7.5條件下反應(yīng)1分鐘,能夠水解1nmol p-nitrophenyl phosphate所需的酶量定義為一個(gè)活性單位。

使用說(shuō)明:
1. Lambda Protein Phosphatase對(duì)不同蛋白的脫磷酸化反應(yīng)有不同活性,所以在實(shí)際應(yīng)用中,建議對(duì)酶濃度和反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化。反應(yīng)體系中,反應(yīng)緩沖液為1× Lambda Protein Phosphatase Buffer并且同時(shí)加入1× MnCl2 (最終濃度為1mM)。
2. 以一般的去磷酸化反應(yīng)為例:在50μl反應(yīng)體系中,100U的Lambda Protein Phosphatase在30分鐘內(nèi)可以除去相當(dāng)于5μM的磷酸化的蛋白(單磷酸化)中約100%的磷酸。

注意事項(xiàng):
1. 避免反復(fù)凍融,為方便后續(xù)使用建議適當(dāng)分裝后保存。
2. 相關(guān)抑制劑:10mM釩離子 (vanadate ions) 能抑制Lambda Protein Phosphatase活性約90%,50mM EDTA可以抑制Lambda Protein Phosphatase活性約95%,1% Triton X-100、0.4% Nonidet P-40、0.025% Tween 20、0.5M NaCl、0.1mM ATP、10μg/ml pepstatin A、10μg/ml leupeptin, 10μg/ml aprotinin, 0.5mM PMSF、1mM benzamidine不影響Lambda Protein Phosphatase的酶活性。
3. 該酶的最佳反應(yīng)溫度是30℃。
4. 某些樣品的粗提液中使用該酶進(jìn)行去磷酸化處理時(shí),請(qǐng)縮短操作時(shí)間,同時(shí)添加適量蛋白酶抑制劑以減少目的蛋白的降解。

產(chǎn)品圖片
The purity of the protein is greater than 90% as determined by reducing SDS-PAGE.
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