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Tuner（DE3）Chemically Competent Cell100μl/支￥ 1300.00100 個(gè)
Tuner(DE3)： 100μl/支
pUC19 (control vector，10pg/μl): 10μl
保存條件(保質(zhì)期)： -80℃（6個(gè)月）
基因型
F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm lacY1 (DE3)
Tuner(DE3)Chemically Competent Cell
產(chǎn)品說明
Tuner(DE3)菌株是BL21菌株的lacZY基因 (半乳糖苷透性酶基因)突變株，此突變導(dǎo)致IPTG以均一速度進(jìn)入體系中大腸桿菌的每個(gè)細(xì)胞，產(chǎn)生更加嚴(yán)格、均一的濃度依賴。此菌株用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體T7啟動(dòng)子的表達(dá)載體 (如pET系列)的基因。λ噬菌體DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶，該區(qū)整合于Tuner的染色體上，所以稱為Tuner(DE3)，可同時(shí)表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。Tuner(DE3)感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達(dá)107 cfu/μg DNA。
操作方法
1.Tuner(DE3)感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)�；蜻B接產(chǎn)物）并用手打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
試驗(yàn)前請仔細(xì)閱讀說明書，本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。
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文獻(xiàn)名稱
