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OverExpress C43（DE3） Chemically Competent Cell100μl/支￥ 1280100 個(gè)
OverExpress C43(DE3)： 100μl/支
pUC19 (control vector，10pg/μl): 10μl
保存條件(保質(zhì)期)： -80℃（6個(gè)月）
基因型
F–ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)
OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell
產(chǎn)品說(shuō)明
OverExpress C43(DE3)、OverExpress C41(DE3)兩個(gè)菌株均起源于BL21(DE3)，其優(yōu)點(diǎn)是可以高效表達(dá)毒性蛋白或疏水性蛋白。OverExpress C41(DE3)跟BL21(DE3)的區(qū)別在于其基因組含有至少一個(gè)未知突變，這個(gè)未知突變使其獲得了高效表達(dá)毒性蛋白 (1-5)的能力，此突變位點(diǎn)參與大腸桿菌表達(dá)毒性蛋白時(shí)的細(xì)胞死亡途徑；OverExpress C43(DE3)來(lái)源于OverExpress C41(DE3)，是通過(guò)篩選OverExpress C41(DE3)對(duì)另一個(gè)不同毒性蛋白的抗性菌株獲得。OverExpress C43(DE3)菌株具有比OverExpress C41(DE3)更強(qiáng)的表達(dá)毒性蛋白和疏水性蛋白的能力，所以說(shuō)OverExpress C43(DE3) 菌株與BL21(DE3)相比擁有至少兩個(gè)未知突變，正是這兩個(gè)未知突變使其獲得了更廣泛的表達(dá)毒性蛋白或疏水性蛋白的能力。此菌株含有DE3區(qū)，可同時(shí)表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。OverExpress C43(DE3)感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)5×108 cfu/μg DNA。
操作方法
1. OverExpress C43(DE3)感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)�；蜻B接產(chǎn)物）并用手打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生 素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
試驗(yàn)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。
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文獻(xiàn)名稱
