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NoveBlue（DE3） Chemically Competent Cell100μl/支￥ 1080100 個(gè)
NovaBlue(DE3)： 100μl/支
pUC19 (control vector，10pg/μl): 10μl
基因型
F`[ proA+B+ lacIq ZΔM15::Tn10 (TetR)] endA1 hsdR17(rk12-,mk12+) supE44 thi -1 recA1 gyrA96 relA1 lac(DE3)
NoveBlue(DE3) Chemically Competent Cell
產(chǎn)品說(shuō)明
NovaBlue(DE3)來(lái)源于K12菌株，具有*的轉(zhuǎn)化效率，是轉(zhuǎn)化效率高的原核表達(dá)菌株，可同時(shí)用于普通質(zhì)粒的構(gòu)建和蛋白的原核表達(dá)。NovaBlue(DE3)菌株染色體DNA中整合了λ噬菌體DE3區(qū)，使得NovaBlue(DE3)菌株可同時(shí)表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，廣泛用于pET系列，pGEX，pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。NovaBlue(DE3)菌株具有四環(huán)素抗性，endA1和recA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取；lacZΔM15的存在使NovaBlue(DE3)可用于藍(lán)、白斑篩選。生產(chǎn)的NovaBlue(DE3)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率達(dá)109cfu/μg DNA。
操作方法
1. NovaBlue(DE3)感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)�；蜻B接產(chǎn)物）并用手打EP管底混勻，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的LB培養(yǎng)基上（若質(zhì)粒濃度較高，也可稀釋后涂板，務(wù)必保證能在平板上挑到單克隆菌落）。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
試驗(yàn)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書，本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。
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文獻(xiàn)名稱
