血乙醇測(cè)定試劑盒說(shuō)明書
免責(zé)聲明: 測(cè)試前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,預(yù)試后再進(jìn)行批量實(shí)驗(yàn),否則
由此導(dǎo)致的后果用戶自行承擔(dān)!
一、試劑盒用途:
本試劑盒用于定量測(cè)定血清或血漿中的乙醇含量。
二、測(cè)定原理:
乙醇與NAD+在乙醇脫氫酶催化下產(chǎn)生乙醛與NADH，NADH 改變340nm處的吸光率，通過(guò)測(cè)定340nm處吸光率改變，計(jì)算 血清（漿）中乙醇濃度。
三、 自備儀器與試劑:
全自動(dòng)化生化分析儀或具有340nm波長(zhǎng)的半自動(dòng)生化分析儀、 分光光度計(jì)、酶標(biāo)儀，蒸餾水。
四、試劑組成和配制:
|
| 試劑名稱 | 組分 | 參數(shù) |
| 試劑一 | 干粉 | NAD+ | ≥5mmol/L |
| 乙醇脫氫酶 | ≥500U/L | ||
| 試劑二 | 緩沖液 | Tris-HCl緩沖液 | pH9.0 |
| 試劑三 | 標(biāo)準(zhǔn)液 | 無(wú)水乙醇 | 95% |
五、試劑規(guī)格：
試劑一：干粉×8瓶
試劑二：液體×40mL；
儲(chǔ)存：原包裝試劑在2-8°C避光儲(chǔ)存，12個(gè)月內(nèi)有效。
六、測(cè)定步驟:
1. 樣本要求：最適樣本為當(dāng)日空腹采集的無(wú)溶血、無(wú)乳糜的 血清或肝素抗凝血漿；
2. 工作液配置：每瓶干粉按規(guī)格用5mL緩沖液溶解，混勻， 室溫放置3-5分鐘，工作液2-8℃避光儲(chǔ)存，當(dāng)日使用；
3. 應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液配置：取20μL標(biāo)準(zhǔn)液加入30mL蒸餾水混勻，此 應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液濃度為46.5mg/dL（10mmol/L），當(dāng)日使用；
4. 全自動(dòng)生化儀測(cè)試參數(shù)
| 分析方法 | 兩點(diǎn)速率法 | 主波長(zhǎng) | 340nm |
| 反應(yīng)方向 | 升反應(yīng)（+） | 標(biāo)準(zhǔn)值 | 46.5mg/dL |
| 樣品量 | 20μL | 試劑量 | 250μL |
| 延遲時(shí)間 | 30秒 | 測(cè)量時(shí)間 | 60秒 |
5. 半自動(dòng)生化儀測(cè)試參數(shù)
| 分析方法 | 兩點(diǎn)速率法 | 主波長(zhǎng) | 340nm |
| 反應(yīng)方向 | 升反應(yīng)（+） | 標(biāo)準(zhǔn)值 | 46.5mg/dL |
| 樣品量 | 50μL | 試劑量 | 600μL |
| 延遲時(shí)間 | 30秒 | 測(cè)量時(shí)間 | 60秒 |
6. 分光光度法
|
| 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 |
| 工作液 (μl） | 1000 | 1000 |
| 應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液 (μl） | 80 |
|
| 待測(cè)樣本 (μl） |
| 80 |
| 加入樣本（或標(biāo)準(zhǔn)品）后立即混勻并計(jì)時(shí)，于波長(zhǎng)340nm ，30 秒時(shí)讀取吸光度值A1；靜置60秒，于90秒時(shí)讀取吸光度值A2。 計(jì)算△A/min=（A2-A1）/min。 | ||
注：樣品含量如超出可檢測(cè)線性范圍上限時(shí)（上限見(jiàn)下），需將該樣品用生理鹽水稀釋，測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
七、乙醇含量計(jì)算
ΔA樣/分鐘：樣品管每分鐘吸光度變化值；
ΔA標(biāo)準(zhǔn)/分鐘：標(biāo)準(zhǔn)品管每分鐘吸光度變化值； C標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)品的乙醇濃度。
八、參考范圍
0-20mg/dL（0-0.43mmol/L）；
建議各實(shí)驗(yàn)室建立本實(shí)驗(yàn)室的參考值范圍。
九、產(chǎn)品性能指標(biāo)
1. 試劑空白吸光度：A340<0.300；
2. 實(shí)驗(yàn)空白吸光度變化率：ΔA/min≤0.004；
3. 線性范圍：0-100mg/dL或0-21.5mmol/L（r2>0.990）；
4. 準(zhǔn)確性：相對(duì)偏差B%≤15.0%；
5. 重復(fù)性：精密度CV%≤5.0%；批內(nèi)差CV%≤8.0%；批間差 CV%≤10.0%。
十、注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)，不可用于臨床診斷，切勿服用；
2. 樣品采集時(shí)切勿使用乙醇或碘酒進(jìn)行消毒；
3. 試劑與樣本量可以按照儀器需求，等比例增減。
