細胞背景：肺泡巨噬細胞由單核細胞分化而來，廣泛分布在肺間質內(nèi)，在細支氣管以下的管道周圍和肺泡隔內(nèi)較多。肺泡巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。吸入空氣中的塵粒、細菌等異物進入肺泡和肺間質，多被巨噬細胞吞噬清除，故細胞胞質內(nèi)常見塵粒、細菌等物進入肺泡和肺間質，多被巨噬細胞吞噬清除，故細胞胞質內(nèi)常見塵粒、次級溶酶體及吞噬體等。肺巨噬細胞還可吞噬衰老的紅細胞，在心力衰竭患者出現(xiàn)肺瘀血時，大量紅細胞從毛細血管溢出，被巨噬細胞吞噬。吞噬異物的巨噬細胞，有的從肺泡腔經(jīng)呼吸道粘液流動和纖毛運動而被咳出，有的進入肺淋巴管隨淋巴進入肺淋巴結內(nèi)。
收貨處理：取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度：細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)：可傳2-3代，建議收到細胞后盡快進行相關實驗
傳代比例：首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基
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